论文部分内容阅读
玉米胚芽粕是玉米胚芽炸油后的主要副产物，粗蛋白质含量约为20%。目前大多数的玉米胚芽粕用作饲料或者直接废弃，并没有发挥其潜在的经济价值。而玉米肽具有降血压、促进乙醇代谢等多种生物活性，如能将低附加值的玉米胚芽粕中蛋白质通过一定手段降解为高附加值的玉米肽，则对玉米的综合利用和玉米肽产业均具有重要意义。本课题采用黑曲霉和米曲霉发酵处理玉米胚芽粕，利用霉菌生长时分泌的蛋白酶来降解胚芽蛋白，使其变成有生物活性的玉米肽。主要研究结果如下：（1）通过一系列单因素试验和Box-Behnken响应面试验，分别对黑曲霉和米曲霉的发酵条件进行了优化，黑曲霉发酵玉米胚芽粕的最佳发酵条件：玉米胚芽粕含量50%(50%麸皮)，培养基含水量70%，接种量12%，发酵时间96h，培养温度30℃，此条件下玉米肽转化率达到最大为30%；米曲霉发酵玉米胚芽粕的最佳发酵条件：玉米胚芽粕含量39%(61%麸皮)，培养基含水量70%，接种量8%，发酵时间95h，培养温度30℃，玉米肽转化率达到最大为37%。通过对比两者的玉米肽转化率和总糖含量，最后选定米曲霉来发酵生产玉米肽。（2）对米曲霉发酵制得的玉米肽进行了初步的分离纯化，然后用相对分子质量104的中空纤维柱超滤，得到分子质量在104以下的超滤液，超滤液经SephadexG-25柱分离和相对分子质量分布的测定，共洗脱出2个峰。经过计算，其各级玉米肽组分相对分子质量分别大约为5128和1626Da。为了进一步验证这两种组分的纯度，我们在实验中用Tricine-SDS-PAGE电泳进行了验证，并证明确实主要为两种组分，与葡聚糖凝胶柱分离结果相符。由于玉米肽提取液中还原糖含量很高，因此G-25进行了脱糖实验，最后确定了脱糖最佳条件。（3）对上述初步分离（超滤除蛋白，凝胶G-25除低分子还原糖）得到的到的低分子多肽进行了性质研究，包括其氨基酸组成分析、抗氧化性、溶解性、表观粘度，结果表明所得的玉米肽是一种良好的生物活性肽。