下调lncRNA AC006050.3表达对胃癌细胞BGC-823增殖、迁移、侵袭的影响

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背景及目的:胃癌是全球发病率以及病死率均较高的消化系统恶性肿瘤,对人类的健康状况、生存质量构成了严重威胁。增殖、迁移、侵袭等细胞的生物学行为的改变是影响胃癌发生发展以及预后的重要因素。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)是没有蛋白编码功能的长链RNA,长度在200nt以上,可通过调节转录、表观遗传等过程对基因编码发挥调节功能。lnc RNA AC006050.3位于人类17号染色体,长度为160585bp,主要存在于生物体内,目前全世界范围内针对该基因与消化系统肿瘤的相关研究尚无明确结论。在前期芯片筛查与组织层面表达水平检测的基础上通过检测胃癌细胞与正常胃粘膜上皮细胞中AC006050.3的表达差异以及对胃癌细胞BGC-823迁移、增殖、侵袭能力的影响,为AC006050.3作为胃癌患者诊断以及治疗预后的分子靶点的可能性提供依据。方法:(1)q RT-PCR验证AC006050.3在胃癌细胞MKN-45、SGC-7901、BGC-823,以及正常胃粘膜上皮细胞GES-1中的表达情况。(2)脂质体转染法将设计合成的si RNA转染到BGC-823,并用q RT-PCR验证转染效率。(3)CCK8、Trans-well、划痕实验验证AC006050.3对BGC-823增殖、迁移、侵袭能力的影响。(4)WB实验检测下调AC006050.3前后BGC-823中迁移侵袭相关蛋白MMP-2与MMP-9表达量的变化。结果:(1)q RT-PCR结果显示胃癌细胞MKN-45、SGC-7901、BGC-823中AC006050.3的表达量高于正常胃粘膜上皮细胞GES-1,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)q RT-PCR结果BGC-823转染si RNA后AC006050.3表达水平明显下调,差异显著(P<0.001)。(3)实验组胃癌细胞BGC-823的增殖能力相较于阴性对照组减弱,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕实验阴性对照组胃癌细胞BGC-823的48h迁移率高于实验组,差异具有统计学意义(P<0.05);Trans-well实验组胃癌细胞BGC-823迁移及侵袭能力减弱,与阴性对照组相比差异具有显著(P<0.001)。(4)实验组胃癌细胞BGC-823中侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9表达水平低于阴性对照组,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)AC006050.3在胃癌细胞中表达量升高。(2)下调AC006050.3表达可能减弱胃癌细胞BGC-823增殖、迁移、侵袭。(3)AC006050.3有望成为新的胃癌靶向治疗的分子靶点。
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