目的:建立野生型小鼠、Legumain条件性基因敲除小鼠缺血再灌注损伤模型,探究肾功能、肾组织变化、Legumain表达变化。建立野生型小鼠、Legumain条件性基因敲除小鼠肾小管上皮细胞缺氧/再灌注损伤模型,探究Legumain在缺氧损伤中可能的作用机制。方法:C57BL/6野生型小鼠与Legumain条件性基因敲除小鼠各30只,行右肾切除后随机分为:对照组、缺血再灌注损伤组,采用夹闭左肾蒂30min缺血,缺血后再灌注不同时间(1h、6h、24h),检测各组Scr、BUN水平,肾组织形态学变化,免疫组化技术与蛋白印迹分析Legumain的表达。分离、培养C57BL/6小鼠与Legumain条件性基因敲除小鼠肾小管上皮细胞,通过矿物油覆盖培养基的方法进行缺氧/再灌注操作,蛋白印迹分析与流式细胞技术分析Legumain与凋亡蛋白Caspase 3的表达。结果:野生型小鼠肾脏缺血再灌注损伤后,肌酐与尿素氮水平较对照组明显升高,在三个时间点,肌酐:1h:p=0.021,6h:p=0.018,24h:p=0.001,尿素氮:1h:p=0.003,6h:p=0.000,24h:p=0.007;Legumain条件性基因敲除小鼠肾脏缺血再灌注损伤后,肌酐与尿素氮水平较对照组明显升高,在三个时间点,肌酐:1h:p=0.017,6h:p=0.012,24h:p=0.000,尿素氮:1h:p=0.001,6h:p=0.000,24h:p=0.009;Legumain条件性基因敲除小鼠肌酐与尿素氮水平较野生型小鼠高,差异无显著性。野生型小鼠与Legumain条件性基因敲除小鼠肾脏缺血再灌注后,肾组织损伤加重,表现为肾小管官腔扩张、上皮细胞肿胀、空泡变性、坏死。野生型小鼠肾小管上皮细胞缺氧/再灌注损伤后Legumain表达比对照组显著增强,观察到细胞凋亡;Legumain条件性基因敲除小鼠肾小管上皮细胞缺氧/再灌注损伤后出现细胞凋亡,较野生型小鼠明显。结论:Legumain条件性基因敲除小鼠肾缺血再灌注损伤较野生小鼠重,肾小管上皮细胞缺氧/再灌注后凋亡加重,Legumain可能通过抗凋亡机制对肾小管上皮细胞起保护作用。