【摘 要】
：
目的:在细胞水平上,初步探究镉在致神经细胞凋亡的过程中,JAK2/STAT3信号通路、胆碱能系统以及Klotho基因的作用机制,为探究镉致认知功能障碍的机制提供线索。方法:本次研究以PC12细胞为研究材料,MTT细胞活力检测法确定PC12镉染毒剂量和抑制剂使用浓度,将实验分为（1）0μM、10μM和20μM Cd Cl2染毒组,（2）0h、12h和24h Cd Cl2染毒组,（3）空白对照组、溶剂
【基金项目】
：
项目名称:JAK2/STAT3信号通路及Klotho基因在镉暴露对认知功能影响中的作用机制研究，项目合同编号:8166120046，项目来源:国家自然科学基金，项目起止时间:2017年01月-2020年12月
论文部分内容阅读
目的:在细胞水平上,初步探究镉在致神经细胞凋亡的过程中,JAK2/STAT3信号通路、胆碱能系统以及Klotho基因的作用机制,为探究镉致认知功能障碍的机制提供线索。方法:本次研究以PC12细胞为研究材料,MTT细胞活力检测法确定PC12镉染毒剂量和抑制剂使用浓度,将实验分为（1）0μM、10μM和20μM Cd Cl2染毒组,（2）0h、12h和24h Cd Cl2染毒组,（3）空白对照组、溶剂对照组、20μM Cd Cl2组和20μM Cd Cl2+10μM AG490（JAK2/STAT3通路抑制剂）组,（4）对照组、20μM Cd Cl2组和20μM Cd Cl2+10μM Mc N-A 343（M1毒蕈碱型乙酰胆碱受体激动剂）组。收集处理后的细胞,Annexin V-FITC/PI双染各处理组细胞通过流式细胞仪分析细胞凋亡率。逆转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测各组细胞JAK2、STAT3和Klotho基因的mRNA相对表达量。蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和Klotho蛋白的表达量。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测胆碱能系统中Ach、ACh E和Ch AT的活性。SPSS 22.0用于实验数据的分析,单因素方差分析（One-way ANOVA）用于组间比较,组间两两比较采用LSD法。结果:1.（1）不同剂量（0μM、10μM和20μM）和不同时间（0h、12h和24h）镉染毒PC12细胞结果显示镉诱导的PC12细胞凋亡率随剂量增加和时间延长而升高（p0.05）;与20μM Cd Cl2组相比,添加了AG490后JAK2和STAT3蛋白表达略有降低,二者磷酸化蛋白表达水平明显降低（p0.05）。（4）与20μM Cd Cl2处理组比较,添加了激动剂Mc N-A 343的PC12细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase 3的表达水平显著降低（p<0.05）。（5）与20μM Cd Cl2处理组比较,添加了激动剂Mc N-A 343的PC12细胞胆碱能系统活性有所升高,表现为细胞培养基中ACh和ACh E浓度上升（p<0.05）,裂解液中Ch AT浓度上升（p<0.05）。结论:1.镉可以通过激活PC12细胞JAK2/STAT3信号通路介导胆碱能系统活性下降,导致PC12细胞的凋亡。2.高剂量的镉可引起PC12细胞内Klotho蛋白表达量降低,可能导致与其相关功能受损。
其他文献
目的:探讨行半肝切除术的肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者术前营养风险筛查-2002（nutritional risk screening 2002,NRS-2002）评分对术后并发症及预后的预测价值,为有营养风险的患者在围术期治疗策略的制定提供有益的参考依据。方法:收集2015年8月至2018年8月期间在广西医科大学附属肿瘤医院肝胆胰脾外科行半肝切除术的72
目的:探索在复发或未控型卵巢癌患者外周血中检测出循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTC）的意义,以及检测结果和临床特征、肿瘤标志物之间的关系。方法:选取经过规范化分期手术和病理确诊的卵巢癌患者共38例,其中术后病情稳定组（对照组）18例,术后复发或未控组（实验组）20例。用免疫磁珠负向富集方法联合叶酸受体阳性靶向PCR法检测其外周血中的循环肿瘤细胞并计数,确定CTC作
目的:回顾性分析在单靶向药物治疗时代下本乳腺癌治疗中心311例可手术的HER2阳性早期乳腺癌患者的治疗情况以及影响预后的相关因素和其生存状况,为HER2阳性早期乳腺癌患者的治疗提供更多的临床数据支持。方法:收集广西医科大学附属肿瘤医院乳腺外科（本中心）2013年-2015年1067名经病理确诊为HER2阳性乳腺癌的女性患者临床资料,选择满足纳入标准者311例。所有患者均接受手术,且按乳腺癌复发风险
第一部分腹腔镜和开腹两种不同手术路径治疗早期宫颈癌的meta分析目的:系统评价开腹手术和腹腔镜手术治疗早期宫颈癌的疗效性和安全性。方法:计算机检索Cochrane、MEDLINE、EMBASE、SCIENCE-DIRECT、Pubmed、Wan Fang、CNKI、VIP数据库,检索时间从建库至2020年1月,并检索纳入文献的参考文献。查找对比腹腔镜和开腹不同手术路径治疗早期宫颈癌的随机对照试验和
目的:血红蛋白H病（hemoglobin H disease,Hb H病）是由α-基因缺陷所导致的α-珠蛋白与β-珠蛋白失衡所引来的,减少相对过剩的β-珠蛋白的生成是治疗Hb H病的关键。我们通过研究靶向β-珠蛋白链m RNAR的siRNA对体外定向分化培养的红系细胞β-珠蛋白的调控作用,为Hb H病的基因治疗提供新的理论支持。方法:1.建立红系细胞的体外分化培养体系,我们通过磁珠分选方法分选人的
目的观察不同自体组织在结膜囊狭窄修复中的临床疗效方法2018年1月至2019年3月在广西医科大学第一附属医院眼科住院的结膜囊狭窄患者10例10眼。其中男7例,女3例,所有患者均有由同一术者完成手术。所有患者依据疾病特点、结膜囊狭窄程度采用不同自体组织移植进行结膜囊狭窄的修复。10例结膜囊狭窄患者包括重度结膜囊狭窄患者7例（7眼）,行自体皮肤游离皮片移植,其中6例（6眼）患者行大腿外侧皮肤游离皮片移
目的探讨儿童结肠息肉的临床特点和病理类型,提高认识为其诊治提供一定参考依据。方法选取我院于2003年1月至2019年8月期间经电子消化内镜检查确诊为结肠息肉患儿的临床资料,分析性别、年龄、临床表现、息肉形态学和病理类型等特征。结果1.性别和年龄特征:本研究共246例,男孩占72.4%（178/246）,女孩占27.6%（68/246）。最小年龄8月,最大年龄13岁5月,平均年龄4.68±1.95岁
目的:探究我院儿科住院患儿无菌体液标本中分离出鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii,AB）的临床分布特点、引起感染的相关危险因素及对常用抗生素的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:回顾性分析广西医科大学第一附属医院2012-2018年间99例无菌体液标本中鲍曼不动杆菌阳性患儿的临床资料,所收集的基本资料和造成感染可能的危险因素包括患儿的年龄、性别、入住的科室、原
目的:探讨近视眼SMILE术后角膜前、后表面曲率的变化情况,及其与多项影响因素的相关性,分析曲率测量值与实际值的拟合程度,了解角膜屈光力和前后表面形态变化的特点。方法:采用回顾性研究方法,随机抽样收集2017年9月至2019年3月在广西医科大学第一附属医院眼科接受SMILE手术的50例（100只眼）的近视眼患者的病例资料,收集术前及术后1周、1个月、6个月裸眼视力、最佳矫正视力、等效球镜度、眼轴（
目的:来自柬埔寨和其他东南亚地区的单眼镜蛇所致中毒临床特点可能与其他地区眼镜蛇存在差异,在中毒表现和对抗蛇毒血清治疗上可能有所不同,本研究旨在探究柬埔寨单眼镜蛇的神经毒性和细胞毒性的临床特点,及对使用抗蛇毒血清的有效性。方法:回顾性分析2010年1月至2020年1月柬埔寨某三级甲等医院收治的单眼镜蛇咬的26例患者的临床资料。纳入标准是蛇咬和蛇证据,如活蛇、图片或良好的描述。将患者分为入院时有明显的