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水稻(Oryza sativa L.)是重要的粮食作物,通过转基因途径培育水稻抗虫品种的研究日益受到重视.Bt(Bacillus thuringiensis)毒蛋白是苏云金杆菌孢子形成期产生的伴胞晶体蛋白,具有高度特异的杀虫活性.本实验通过农杆菌介导法,将其中一种Bt毒蛋白基因——cryIAb导入2个云南水稻栽培品种(滇系4号,合系39号)的愈伤组织中,经过潮霉筛选后,获得了一批抗性苗,其中有6株滇系4号,2株合系39号PCR检测为阳性,并由此建立了一套有效的水稻遗传转化体系.我们还为下一步的水稻抗寒转基因研究构建了甘油-3-磷酸转酰酶(Glycerol-3-Phosphate Acyltransferase,(GPAT))基因的表达载体.采用适于单子叶植物表达的冷诱导ABRC1+Amy64minimal promoter作为GPAT基因的启动子,适用于转化水稻的pCAMBIA1300质料作为表达载体,根据构建过程涉及到的GPAT基因、pGEM-T克隆载体、启动子、PinⅡ终止子和pCAMBIA1300表达载体上的酶切位点,制订出一条相对较为简便的构建路线:1.启动子与GPAT基因的连接;2.终止子与pCAMBIA1300的连接;3,最后启动子-GPAT与终止子-pCAMBIA1300连接,并成功地将GPAT基因的表达载体构建出来,现正被用于水稻的转化.