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目的:
通过化学去细胞异种神经基膜管复合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和神经生长因子(NGF)修复大鼠坐骨神经缺损的实验,进一步探索bFGF和NGF联合应用于异种去细胞神经基膜管移植修复周围神经缺损的效果。
方法:
用化学方法处理兔胫神经制成去细胞神经基膜管,用流式细胞法检测处理前后神经的MHC-Ⅱ类组织相容性抗原,并对去细胞处理后的神经进行HE染色及电镜观察;用雄性Wistar大鼠75只,建立右后肢坐骨神经10mm缺损模型,随机分为5组,实验组Ⅰ为bFGF+NGF组(A组)、实验组Ⅱ为bFGF组(B组)、实验组Ⅲ为NGF组(C组)、对照组Ⅰ为生理盐水组(D组)、对照组Ⅱ为自体神经移植组(E组)。将处理好的神经移植于大鼠的坐骨神经,并按分组肌注bFGF和NGF及生理盐水2周。术后6周行神经电生理检测,包括胫后肌群运动诱发电位,再生神经的传导速度;用HE染色,免疫组化染色,透射电镜等方法对移植段远端吻合口再生神经纤维进行形态学观察,并对再生有髓神经纤维的数量、直径和雪旺氏细胞进行量化分析。
结果:
移植前新鲜神经组MHC-Ⅱ检测值为38.65±16.73,去细胞组MHC-Ⅱ检测值为1.97±1.52,两组比较存在显著性差异(P<0.05),透射电镜观察显示为胶原性管道,无细胞成份;术后6周,5组动物行走均有不同程度的恢复,结果表明,bFGF组、NGF组的运动神经传导速度和神经纤维直径及再生轴突计数优于生理盐水组,bFGF+NGF组、自体神经移植组的运动神经传导速度和神经纤维直径及再生轴突计数高于其余各组,差异有显著性(P<0.05)。bFGF+NGF组与自体神经移植组比较无统计学意义(P>0.05)。组织学观察见5组移植体远端吻合口横切面再生神经纤维呈微束状,透射电镜观察再生神经纤维具有正常的形态和结构。
结论:
经化学萃取的去细胞兔胫神经基膜管移植于大鼠,能够成功修复大鼠坐骨神经缺损,而且移植后注射bFGF+NGF。的去细胞基膜管在神经修复质量上优于单纯的去细胞神经基膜管,更加接近自体神经移植的效果。