石斛是我国传统的中药材,在古代典籍中早有记载。随着人们对石斛的深入研究,其不仅可作观赏类盆栽植物,还可用于药品或保健食品。金钗石斛为天门冬目,兰科(Orchidaceous),石斛属(Dendrobium),含有丰富的生物碱、多糖、酚类等物质,与其它同属石斛相比,金钗石斛生物碱类含量相对较高,故本课题研究了金钗石斛总生物碱提取的最优条件及生物碱纯化方法,并探究生物碱提取物作用在秀丽隐杆线虫(C.elegans)上的活性影响,本论文的主要研究成果如下:(1)优化金钗石斛总生物碱超声波提取方法,利用酸性染料比色法测定生物碱含量,在超声时间、固液比、超声波功率以及乙醇体积分数四项单因素实验的基础上,进行正交优化。结果表明,超声波功率以及乙醇体积分数对金钗石斛总生物碱提取含量具有显著影响(P<0.05),最佳提取条件为超声提取时间25 min,固液比为1:16,超声提取功率为200w,乙醇体积分数为90%时,在此基础上所得贵州所产金钗石斛总生物碱可达4.89 mg/g。(2)通过静态吸附和解析实验筛选出AB-8大孔树脂为最优纯化材料,最佳的纯化条件为:上样体积4 BV,80%的醇洗脱浓度以及1.0 mL/min的流速,上样pH4.0,上样浓度0.3 g/mL,茎高比1:9。纯化物通过HPLC检测石斛碱含量为3.16mg/g。方法学考察结果表明:精密度、重复性和稳定性良好,RSD均低于10%,回收率99.47%,RSD值2.38%。(3)将纯化获得的金钗石斛的生物碱作用于秀丽隐杆线虫,观察其在线虫的行为能力和咽泵运动的作用效果。结果表明,生物碱对线虫的运动行为具有正向作用(P<0.05),对线虫摄食行为无明显影响(P>0.05);进一步考察生物碱对线虫生长发育的影响,结果表明其对线虫的体长与体宽均有所积极作用(P<0.05);而在对线虫生殖能力影响的实验中,未能发现其会对线虫的产卵能力和产卵周期产生影响;在对石斛生物碱对秀丽隐杆线虫寿命影响的实验中,则发现其对线虫的平均寿命有所延长(P<0.05),并显著增加其在氧化应激环境下的平均生存时间(P<0.05)。