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牙周组织改建是正畸牙齿移动重要生物学基础。其中,最重要一个环节就是破骨细胞对骨质的吸收。而骨形成蛋白是骨组织中一种重要的骨基质蛋白,与骨、牙周组织、神经等组织形成有着极为密切的联系。本实验在体外将分离培养出牙周膜成纤维细胞和从全血中分离出的单个核细胞进行直接共培养,探讨牙周膜成纤维细胞在破骨样细胞形成过程中作用;探讨rhBMP-2对破骨样细胞形成的影响及其可能机制。本研究将实验分为以下两部分:一、牙周膜成纤维细胞对外周血单个核细胞分化的影响目的探讨牙周膜成纤维细胞在破骨样细胞形成过程中作用;观察破骨样细胞的生长过程。方法本实验在体外培养及鉴定出牙周膜成纤维细胞,同时从全血中分离并鉴定具有单个细胞核特征的细胞。以含有1ɑ,25(OH)2D3和地塞米松的培养基将牙周膜成纤维细胞、单个核细胞分别进行单独或直接共培养,每3天对TRAP阳性单个核细胞和TRAP阳性多核破骨细胞的数量及牙本质磨片的吸收陷窝数目和面积分别进行记录、计算。结果不同时间段间的TRAP阳性单个核细胞与TRAP阳性多核细胞数目相比较,差异具有统计学意义(P<0.05);同时,不同组间的吸收陷窝数目和面积比较,差异具有显著性(P<0.001)。牙周膜成纤维细胞明显增加了共培养组TRAP阳性多核细胞数量、吸收陷窝数目和面积。然而牙周膜成纤维细胞组与单个核细胞组之间的吸收陷窝数目与吸收陷窝面积差异无统计学意义(P>0.05)。结论外周血单个核细胞需在牙周膜成纤维细胞存在的条件下,才能形成多核的破骨样细胞。没有牙周膜成纤维细胞就没有TRAP阳性的破骨样细胞。同时,在共培养中,可以发现破骨样细胞在体外存活的时间短暂。二rhBMP-2对破骨样细胞生成的调节作用目的探讨rhBMP-2对破骨样细胞形成的影响及其可能的作用机制。方法以含有1ɑ,25(OH)2D3和地塞米松的培养基将单个核细胞进行单独培养或与牙周膜成纤维细胞直接共培养18天,同时加入或不加入rhBMP-2,观察TRAP阳性单个核细胞和TRAP阳性多核破骨细胞的数量。结果加入rhBMP-2组与未加入rhBMP-2组的TRAP阳性单个核细胞与TRAP阳性多核细胞数目分别比较,差异具有统计学意义(P<0.05);共培养组与单个核细胞组之间的TRAP阳性单个核与多核细胞数目相比较,具有显著性差异(P<0.001);牙周膜成纤维细胞与rhBMP-2之间具有协同作用(P<0.001)。可见rhBMP-2与牙周膜成纤维细胞在多核细胞生成具有重要作用;同时,rhBMP-2与牙周膜成纤维细胞联合作用能促进多核细胞的生成。结论rhBMP-2有促进破骨样细胞生成的作用,但需要牙周膜成纤维细胞存在的情况下;rhBMP-2可能是通过牙周膜成纤维细胞间接作用于外周血单个核细胞的。