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目的:本文拟通过探究幽门螺杆菌相关胃病（Helicobacter pylori-related gastric diseases,HPGD）中脾胃湿热证患者胃黏膜的NLRP3、IL-1β表达以及胃内微生态的分布特征,以探讨HPGD脾胃湿热证的发病实质。方法:本研究共收集107例HPGD病例的胃黏膜标本,其中慢性浅表性胃炎（Chronic superficial gastritis,CSG）49例,慢性萎缩性胃炎（Chronic atrophic gastric,CAG）45例,胃癌（Gastric cancer,GC）13例。所有病例遵循中医证候诊断标准,其中脾胃湿热证有70例,脾气虚证有37例。同时招募正常受试者10名。采用病理组织切片HE染色明确疾病诊断,快速尿素酶和美兰染色法确定幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）的感染及程度,免疫组化方法检测NLRP3、IL-1β的表达,16S r DNA测序检测胃黏膜的菌群,并利用物种丰度、α多样性、β多样性、LDA Effect size分析和metastat等分析方法探讨HPGD脾胃湿热证、不同病种的胃黏膜菌群特征。结果:一、Hp相关胃病不同证候、病种的Hp感染研究1、一般资料:HPGD脾胃湿热证组、脾气虚证组和正常对照组的年龄、病种分布差异无统计学意义（P>0.05）,脾胃湿热证组的男性患病率高于脾气虚证组和正常对照组（P<0.05）。CSG、CAG、GC和正常对照组的性别、年龄比较差异均无统计学意义（P<0.05）。2、HPGD不同证候、病种的Hp感染比较:脾气虚证组的Hp感染率有高于脾胃湿热证的趋势（P>0.05）;不同病种的Hp感染率有CAG>CSG>GC的趋势（P>0.05）,各证型、病种的Hp感染程度差异无统计学意义（P>0.05）;3、HPGD不同证候、病种的炎症比较:脾气虚证组的炎症发生率有高于脾胃湿热证组的趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。不同病种的炎症发生率表现为GC>CAG>CSG（P<0.05）,各证型、病种的炎症程度比较差异无统计学意义（P>0.05）。二、Hp相关胃病不同证候、病种的NLRP3、IL-1β表达情况1、脾胃湿热证组、脾气虚证组和正常对照组三组间的NLRP3、IL-1β表达差异有统计学意义（P<0.05）。两两比较后发现:脾胃湿热证NLRP3、IL-1β表达高于正常对照组（P<0.05）,脾胃湿热证和脾气虚证组差异无统计学意义（P>0.05）。2、正常对照组（NC）、CSG、CAG和GC四组间的NLRP3和IL-1β表达差异有统计学意义（P<0.05）。两两比较后发现:CAG的NLRP3和IL-1β蛋白的表达均高于NC（P<0.05）。3、Hp相关胃病的肠化程度和NLRP3、IL-1β的表达未见显著相关性（P>0.05）。三、Hp相关胃病不同证候、病种的胃内微生态改变的研究1、HPGD脾胃湿热证的胃黏膜菌群分析（1）物种丰度分析:门水平,变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门和梭杆菌门是脾胃湿热证、脾气虚证和正常对照组共同富集的菌群。（2）多样性分析:脾胃湿热证组、脾气虚证组和正常对照组的shannon和simpson指数差异有统计学意义（P<0.05）,其中脾胃湿热证组和正常对照组的shannon和simpson指数差异存在显著统计学意义（P<0.05）,脾胃湿热证组及脾气虚证组的各指数比较差异无统计学意义（P>0.05）。sobs、chao和ace指数三组比较差异无统计学意义（P>0.05）。说明脾胃湿热证组、脾气虚证组和正常对照组的物种丰度和多样性均有显著差异,其中脾胃湿热证组的物种丰度和多样性均低于正常对照组。（3）HPGD脾胃湿热证胃黏膜菌群标志物筛选:（1）脾胃湿热证组和正常对照组:属水平,脾胃湿热证组的优势菌群为幽门螺杆菌,正常对照组的优势菌群有罗氏菌、奈瑟氏菌、副球菌和水栖菌等。（2）脾胃湿热证组和脾气虚证组:属水平,脾气虚证组的优势菌群有梭杆菌、乳杆菌和拟普雷沃菌等,脾胃湿热证组无优势菌群。2、HPGD不同病种间的胃黏膜菌群分析（1）物种丰度分析:门水平,变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门和梭杆菌门等是NC、CSG、CAG和GC四组共同富集的菌群。（2）多样性分析:NC、CSG、CAG和GC四组sobs、chao、ace、shannon和simpson指数差异均存在显著统计学意义（P>0.05）。说明四组的物种丰度和多样性均有显著性差异。其中CAG和CSG的sobs、chao、ace、shannon和simpson指数差异有统计学意义（P<0.05）。GC和NC、CAG和NC的shannon和simpson指数差异有有显著统计学意义（P<0.05）。说明GC相较于NC菌群物种丰度和多样性显著降低,CAG相较于NC、CSG物种丰度和多样性均显著降低。GC和CAG之间物种多样性无明显差异。（3）显著性差异菌群分析:属水平,CSG的优势菌群为奈瑟氏菌、拟普雷沃菌、罗氏菌、普雷沃菌等。CAG的优势菌群为棒状杆菌属-1、粪杆菌属,GC的优势菌为乳杆菌属、Lachnoanaerobaculum、克雷伯杆菌属、Endomicrobium、地嗜皮菌属、嗜油菌属、琼斯氏菌属、食碱菌属和栖热菌属。结论:1、Hp相关胃病中NLRP3、IL-1β的高表达可能是脾胃湿热证的内在致病机理之一;2、脾胃湿热证的胃黏膜菌群多样性减少、物种丰度下降可能是其在Hp相关胃病的内在致病机理之一,;幽门螺杆菌属,罗氏菌、奈瑟氏菌、副球菌属和水栖菌可能是区别脾胃湿热证和健康人的菌群标志之一;梭杆菌属、乳杆菌属和拟普雷沃菌属等菌群可能是区别脾胃湿热证和脾气虚证的菌群标志之一;3、胃内微生态的物种丰度和菌群多样性显著下降可能是导致Hp相关胃病发生及演变的主要因素之一。