目的通过构建大鼠胫骨骨癌痛（bone cancer pain,BCP）模型,观察BCP进展过程中脊髓M1型小胶质细胞活化数目及其相关促炎因子的表达情况,进而探究高乌甲素（lappaconitine,LA）治疗BCP的可能中枢镇痛机制。方法（1）实验一:雌性SD大鼠18只,随机分为3组,每组6只;正常组（Ctrl组）:不做任何处理;假手术组（Sham组）:于右侧胫骨腔内注射热灭活的癌细胞PBS悬浮液;骨癌痛组（BCP组）:于右侧胫骨腔内接种新鲜提取的Walker 256腹水癌细胞PBS悬浮液制备BCP模型。通过缩足阈值（paw withdrawal threshold,PWT）、肢体使用评分、胫骨平片、骨组织切片HE染色综合评估大鼠胫骨BCP模型的构建。（2）实验二:建立大鼠BCP模型,分别采用免疫荧光双重标记染色和Western Blot检测0、6、12、18天时间点大鼠脊髓M1型小胶质细胞（Iba-1+CD68+）活化数目及其相关促炎因子诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、白介素-1β（interleukin-1beta,IL-1β）的表达情况。（3）实验三:自BCP模型建立后第12天开始腹腔注射4 mg/kg的LA或等量生理盐水,连续7天。通过PWT、肢体使用评分,观察对照组（Naive组）、生理盐水治疗组（BCP-NS组）、高乌甲素治疗组（BCP-LA组）大鼠的痛行为学改变。于第18天取材,采用免疫荧光双重标记染色和Western Blot测定各组大鼠脊髓M1型小胶质细胞（Iba-1+CD68+）活化数目的改变及其相关促炎因子iNOS、IL-1β的表达变化。结果（1）痛行为学改变:在整个观察周期内BCP组大鼠PWT及肢体使用评分逐渐降低（P0.05）。胫骨平片:BCP组大鼠胫骨的骨破坏程度呈时间进行性加重,而Ctrl组与Sham组大鼠胫骨骨皮质连续、无骨破坏改变。骨组织切片HE染色:建模后第18天,Ctrl组、Sham组大鼠骨小梁完整、骨组织结构正常,髓腔内可见正常分布的骨髓细胞,而BCP组大鼠骨结构显著破坏,骨髓腔内可见大量核大深染的肿瘤细胞浸润。（2）免疫荧光双重标记染色结果显示脊髓上M1型小胶质细胞（Iba-1+CD68+）数量随时间推移而逐渐增加,与接种癌细胞后第6天相比,第12、18天BCP大鼠脊髓上的M1型小胶质细胞（Iba-1+CD68+）数量均增多,差异有统计学意义（P<0.01）。Western Blot结果显示大鼠胫骨内接种癌细胞后第6、12、18天脊髓M1型小胶质细胞相关促炎因子iNOS和IL-1β的表达水平呈时间依赖性升高趋势,且在第18天时表达上调最为显著（P<0.05）。（3）自BCP模型建立后第12天至第18天,每日给大鼠分别腹腔注射生理盐水或LA后,与BCP-NS组相比,BCP-LA组大鼠的痛行为学明显改善（P<0.05）,表明LA对BCP有一定抑制作用。免疫荧光双重标记染色和Western Blot结果显示,与Naive组相比,BCP-NS组大鼠脊髓M1型小胶质细胞（Iba-1+CD68+）的活化数量及其相关促炎因子iNOS和IL-1β蛋白的表达均明显增加（P<0.05）,而腹腔注射LA可抑制M1型小胶质细胞的增殖活化并下调其相关促炎因子iNOS、IL-1β的表达（P<0.05）。结论高乌甲素可能通过抑制骨癌痛大鼠脊髓M1型小胶质细胞的增殖活化,进而减少其相关促炎因子iNOS、IL-1β的表达,从而产生镇痛作用。