葆青颗粒对卵巢储备功能下降模型大鼠性激素水平和Bax、Bcl-2、VEGF的影响

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目的:观察葆青颗粒对卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve,DOR)模型大鼠性激素水平的影响,探讨葆青颗粒治疗DOR的作用及其机制。方法:纳入动情周期正常的雌性SD大鼠50只,随机选取其中10只作为正常组,剩余大鼠使用一次性腹腔注射环磷酰胺75mg/kg诱导DOR模型,按随机数字表法将造模成功的38只大鼠分为模型组、补佳乐组、葆青颗粒高、低剂量组,并分别予以0.9%氯化钠溶液、补佳乐(0.21mg/kg·d)、葆青颗粒高、低剂量(9g/kg·d、3g/kg·d)连续灌胃三周,计算各组大鼠卵巢指数;HE染色观察卵巢组织病理学变化;酶联免疫吸附法测定血清卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E2)、抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)和卵巢组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平;免疫组化法检测卵巢组织Bax、Bcl-2、VEGF蛋白表达。结果:1、卵巢湿重和卵巢指数:与正常组比较,各组大鼠卵巢湿重和卵巢指数均降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组卵巢湿重和卵巢指数均升高(P<0.05);与葆青高剂量组相比,葆青低剂量组卵巢湿重和卵巢指数降低,而补佳乐组显著升高(P<0.05)。2、FSH水平比较:与正常组比较,各组大鼠FSH水平均升高,其中以模型组升高最为显著(P<0.05);与模型组比较,各给药组FSH水平降低(P<0.05);与补佳乐组比较,葆青低剂量组FSH水平仍较高(P<0.05);相比葆青高剂量组,补佳乐组和葆青低剂量组FSH水平无明显差异(P>0.05)。3、LH水平比较:与正常组比较,葆青低剂量组和模型组LH水平升高显著(P<0.05),而葆青高剂量组和补佳乐组LH水平亦升高,但无统计学差异(P>0.05);与模型组比较,各给药组LH水平均降低(P<0.05);与补佳乐组相比,葆青低剂量组LH水平仍较高(P<0.05);相比葆青高剂量组,葆青低剂量在调节LH水平方面效果欠佳(P<0.05)。4、AMH水平比较:与正常组比较,葆青低剂量组和模型组AMH水平降低明显(P<0.05),而葆青高剂量组和补佳乐组AMH水平亦降低,但无统计学差异(P>0.05);与模型组比较,各给药组AMH水平均升高(P<0.05);与补佳乐组相比,葆青高剂量组AMH水平升高,葆青低剂量组AMH降低,但均无统计学差异(P>0.05);相比葆青高剂量组,葆青低剂量在改善AMH水平方面效果欠佳(P<0.05)。5、E2水平比较:与正常组比较,除补佳乐组外,各组E2水平均降低明显(P<0.05);与模型组比较,各给药组E2水平均升高(P<0.05);与补佳乐组相比,葆青颗粒各剂量组E2水平变化不明显(P>0.05);相比葆青高剂量组,补佳乐在改善E2水平方面效果更佳(P<0.05)。6、卵巢组织VEGF水平比较:与正常组比较,模型组VEGF水平降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组VEGF水平均升高(P<0.05);余各组间比较,无显著差异(P>0.05)。7、卵巢组织VEGF蛋白表达水平比较:各组大鼠卵泡、黄体及颗粒细胞均可见VEGF蛋白表达,与正常组比较,各组VEGF蛋白表达均下调(P<0.05);与模型组比较,各给药组VEGF蛋白表达均上调(P<0.05);与补佳乐组相比,葆青低剂量组VEGF蛋白表达下调(P<0.05);相比葆青高剂量组,葆青低剂量组VEGF蛋白表达下调(P<0.05),而与补佳乐组之间无显著差异(P>0.05)。8、卵巢组织Bax蛋白表达水平比较:与正常组比较,各组大鼠卵巢组织中Bax蛋白表达均上调,并以模型组上调最显著(P<0.05);与模型组比较,各给药组Bax蛋白表达均下调,并以补佳乐组下调最显著(P<0.05);与补佳乐组相比,葆青各剂量组Bax蛋白表达均上调(P<0.05);相比葆青高剂量组,葆青低剂量在下调Bax蛋白表达方面效果欠佳(P<0.05)。9、卵巢组织Bcl-2蛋白表达水平比较:与正常组比较,模型组和葆青低剂量组Bcl-2蛋白表达均下调(P<0.05);与模型组比较,各给药组Bcl-2蛋白表达均上调(P<0.05);与补佳乐组相比,葆青低剂量组Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05),而与葆青高剂量组之间无显著差异(P>0.05);相比葆青高剂量组,葆青低剂量组Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05)。结论:CTX对大鼠卵巢储备功能有一定损伤作用,能加速卵泡闭锁,使卵巢组织Bax蛋白表达升高、VEGF和Bcl-2蛋白表达降低,且使血清FSH和LH水平升高,AMH、E2和卵巢组织VEGF水平下降。而葆青颗粒能改善CTX模型大鼠卵巢储备功能,此作用可能通过降低Bax的表达,同时上调VEGF和Bcl-2表达,进而降低血清FSH和LH水平,升高血清AMH、E2和卵巢组织VEGF水平来实现。
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