本文对高危鼻型结外NK/T细胞性淋巴瘤临床及相关实验进行了研究。文章分为三个部分：　　 第一部：分结外NK/T细胞性淋巴瘤治疗模式研究。　　 目的：WHO分类中将结外NK/T细胞性淋巴瘤(ENKCL；extranodal NK/T-celllymphoma)作为一种独特的病理亚型。在亚洲地区发病率较高，与EB病毒(Epstein-Barr Virus，EBV)关系密切，临床表现为高度侵袭性的过程，预后很差，至今未建立标准的治疗。对于Ⅰ期局限性鼻腔NK/T细胞性淋巴瘤放疗可能起治愈性作用。对于Ⅱ期以上的患者治疗效果并不满意。因此我们收集210例NK/T细胞性淋巴瘤来探讨其临床病理特征和治疗模式。　　 方法：收集1997年至2008年的210例经病理证实为ENKCL且临床资料完整的患者，根据不同治疗方法、部位和分期进行分析CR率、PFS和OS。　　 结果：与鼻外病变对比，鼻腔病变早期(Ⅰ/Ⅱ期)患者较多。而年龄(p=0.074)，性别(p=0.512)，ECOG PS(p=0.953)，B症状(p=0.257)，LDH(p=0.314)和治疗模式(p=0.110)，两不同部位组间无显著差异。单纯化疗组(CT)、单纯放疗组(RT)和联合治疗组(CMT)的CR率分别为28％(19/69)、67％(20/30)、和78％(86/111)(p＜0.001)。在三个不同治疗组鼻腔病变的CR率分别为35％、68％和82％(p＜0.001)；鼻外病变的CR率分别为15％、60％和67％(p＜0.001)。全组患者中位PFS和OS分别为21.0月(95％CI：14.0-27.8月)和33.3月(95％CI：18.2-48.5月)。2年、3年和5年的PFS分别为48％、40％和35％。2年、3年和5年的OS率分别为56％、48％和39％。鼻腔病变与鼻外病变对比3年PFS和OS具有显著差异49％vs.18％(p＜0.001)和55％vs31％(p=0.001)。对比CT组患者，CMT组3年OS显著延长(p=0.001)，3年PFS p值处于临界值(p=0.058)。与CT组对比，鼻腔病变CMT组3年PFS和OS显著延长(PFS：p=0.005；OS：p=0.001)；而鼻外病变两治疗组3年OS有显著差异，3年PFS未见统计学差异(PFS：p=0.692；OS：p=0.019)。全身复发与治疗模式(p=0.389)和发病部位(p=0.279)无关。　　 结论：ENKCL患者预后较差，生存期较短，对一般的化疗方案敏感性差，易于复发。放疗在早期患者中发挥重要作用，但有效的化疗在提高CR率和降低全身复发方面仍然有作用，特别是对于晚期和鼻外病变。需要探索更有效的化疗方案以提高CR率和生存期。鼻腔和鼻外病变是两种性质和不同的病变。但是不论鼻腔还是鼻外病变应该采用有效的化疗以延长PFS，减少全身复发。　　 第二部分：血浆miR-221表达在结外NK/T细胞性淋巴瘤中的意义。　　 目的：由于部分T细胞淋巴瘤的临床、预后特点与结外鼻型NK细胞性淋巴瘤较为相似，WHO分型系统也将此部分T细胞淋巴瘤与结外鼻型NK细胞性淋巴瘤合为一体，统称为结外鼻型NK/T细胞性淋巴瘤(ENKCL)。ENKCL对放化疗均不甚敏感，即使是Ann Arbor分期(1)较早的疾病，其治疗效果也往往较差。因此，寻找适合ENKCL患者的不良预后因素，在治疗前将病人根据化疗敏感性及危险度区分开来进行个体化治疗，是临床上值得研究的课题。miRNAs是一种内源性小片段(～22 bp)非编码的RNA，主要通过与靶mRNA的3-UTR区碱基配对调节基因表达，进而抑制表达、mRNA断裂或不稳定。在肿瘤相关的调节基因中miRNAs的功能可以作为肿瘤抑制基因或癌基因。一些研究显示外周血的血清和血浆中存在着miRNA的表达。而且miRNA直接扩增与从血浆中提取总RNA然后进行扩增结果一致，因此直接对外周血中的miRNA进行扩增是可行的。一些miRNA在肿瘤细胞耐药方面发挥着重要作用，如miR-221、miR-222和miR-451，因此我们观察血浆中miRNAs(miR-221/222/451)的表达与正常健康人是否有差别，并分析其表达水平与临床特征和治疗效果的相关性。　　 方法：收集79例ENKCL患者化疗前血浆及37例正常健康人血浆。通过直接对血浆中miR-221进行逆转录和real-time PCR技术扩增检测外周血miR-221表达水平，分析各检测指标与患者临床特征、疗效、预后之间的关系。　　 结果：与37例正常健康人对比，79例ENKCL患者血浆miR-221表达显著升高(p=0.038)。进一步分析显示miR-221与性别和ECOG PS相关。经单因素和多因素分析发现血浆miR-221水平(p=0.003)、年龄(p＜0.001)、B症状(p=0.025)、LDH(P=0.003)和初始治疗后CR(p＜0.001)为独立的预后因素。　　 结论：血浆miR-221在结外NK/T细胞性淋巴瘤患者中显著增高，并且升高的患者PS状态和长期疗效差，血浆miR-221可以作为结外NK/T细胞性淋巴瘤辅助诊断指标，并可以作为独立的预后因素。　　 第三部分：结外NK/T细胞性淋巴瘤起源细胞中microRNA表达研究。　　 目的：WHO分类中将结外NK/T细胞性淋巴瘤(ENKCL；extranodal NK/T-celllymphoma)作为一种独特的病理亚型。该病变对化疗耐药，缓解后易于复发，生存期短。肿瘤起源细胞和正常干细胞一样具有自我更新、增殖潜能较低并可以产生多种不同增殖能力的表型不同的前体细胞，而且和正常干细胞一样对化疗和放疗耐受性很强。近年来在多种恶性肿瘤中证实ALDH-1活性和表达可以作为肿瘤起源细胞的标记。MicroRNAs(miRNAs)是一类长约21～23个核苷酸(bp)非编码的单链小分子RNA，通过与靶mRNA的3非翻译区(3-UTR)碱基配对在转录后水平抑制靶mRNA的降解或翻译过程进而起调控基因表达的作用。为了寻求治愈结外NK/T细胞性淋巴瘤的潜在靶点，以减少复发，争取彻底根治该肿瘤，我们尝试对NK/T细胞性淋巴瘤起源细胞调控的miRNAs进行研究，以期发现调控这类细胞的可能的“干细胞miRNAs”。　　 方法：应用SNK-6和SNT-8细胞两种培养体系培养通过流式细胞术检测细胞周期、p-GP和ALDH-1的表达水平及ALDH-1活性改变，进一步行microRNA芯片检测并通过qRT-PCR验证鉴定与肿瘤起源细胞相关的microRNAs。　　 结果：SNK-6细胞在干细胞培养基培养后p-GP和ALDH-1表达水平及活性均较一般培养基培养升高(p-GP表达：75.1％vs27.4％；ALDH-1表达：25.1％vs0.8％；ALDH-1活性：3.6％vs1.1％)，细胞周期G0/G1期比率升高，S期降低(G0/G1期：83.21％vs38.89％；S期：46.63％vs10.55％)。同样SNT-8细胞在干细胞培养基培养后p-GP和ALDH-1表达水平及活性均较一般培养基培养升高(p-GP表达：40.1％vs12.9％；ALDH-1表达：14.0％vs1.6％；ALDH-1活性：0.9％vs0.1％)，细胞周期G0/G1期比率升高，S期降低(G0/G1期：78.8％vs40.28％；S期：50.29％vs10.90％)。经MicroRNA芯片检测，SNT-8组共检出70个基因在干细胞培养体系中升高(升高比率大于2)，一个基因即miR-17表达降低(降低比率小于0.5)。SNK-6组共检出9个基因在干细胞培养体系中升高(升高比率大于2)，17个基因表达降低(降低比率小于0.5)。经qRT-PCR验证发现在两组细胞中miR-17(SNK-6：p=0.001；SNT-8：p=0.015)和miR-135a*(SNK-6：p=0.019；SNT-8：p=p=0.050)具有显著差异。　　 结论：通过将SNK-6和SNT-8在干细胞培养基中培养后，其特性发生改变，肿瘤起源细胞标记ALDH-1的活性及表达升高。经microRNA芯片检测并经qRT-PCR验证，结果显示miR-17和miR-135a*可能在这类细胞中发挥调节作用。