贵州地方猪肉质优良、口感风味好、皮厚、肉质香糯,深受广大消费者的喜爱。本试验以贵州地方猪柯乐猪和宗地花猪(关岭猪类型)作为研究对象,以外三元杂交猪作对照,探索贵州地方猪胶原蛋白含量及其结构特性对肉质的影响,研究FAS、FABP1、COL3A1、LOX基因等相关基因的组织表达规律;同时,有研究表明,脂肪沉积影响胶原蛋白分子间成熟交联的形成,但具体调控机制尚不清楚。故本研究通过克隆FAS、FABP1基因CDS区,构建真核表达载体,从细胞水平探究脂肪沉积对胶原蛋白及其交联的影响,旨在探索地方猪肉质特性的物质基础和可能的调控机理,为肉质的良种选育提供参考依据。主要研究结果如下:1.3个品种不同组织(皮下脂肪、背最长肌)胶原蛋白含量检测;研究结果显示,不同组织胶原蛋白含量存在差异性,3个品种均是皮下脂肪胶原蛋白含量高于背最长肌。其中,宗地花猪皮下脂肪和背最长肌中的胶原蛋白含量极显著高于柯乐猪和外三元杂交猪(P<0.01),肉质糯性和粘弹性最好;柯乐猪皮下脂肪和背最长肌胶原蛋白含量居中,极显著低于宗地花猪(P<0.01),显著高于外三元杂交猪(P<0.05)。2.吡啶交联(HP和LP)在品种间和品种内含量规律没有相关性,羟赖氨酰吡啶嗡(HP)共价交联在背最长肌组织中,以宗地花猪最高。在皮下脂肪组织中,宗地花猪最低,与柯乐猪和外三元杂交猪呈极显著差异(P<0.01);赖氨酰吡啶嗡(LP)共价交联在皮下脂肪和背最长肌中的含量均是宗地花猪最低,在背最长肌组织中的含量与柯乐猪和外三元杂交猪达到极显著差异(P<0.01),在皮下脂肪组织的含量与外三元杂交猪呈极显著差异(P<0.01),与柯乐猪差异不显著。宗地花猪交联含量较低,表明其肌肉嫩度较好。3.COL3A1、LOX、FAS、FABP1基因m RNA在宗地花猪、柯乐猪与外三元杂交猪皮下脂肪和背最长肌中均有表达,但表达量存在差异。COL3A1基因m RNA表达水平在宗地花猪皮下脂肪和背最长肌中表达量均为最高,且皮下脂肪m RNA表达水平极显著高于背最长肌(P<0.01)。说明胶原蛋白含量高的组织COL3A1基因m RNA表达水平较高;而LOX基因m RNA表达规律则与HP和LP共价交联含量趋于一致,在宗地花猪皮下脂肪中的m RNA表达量极显著低于外三元杂交猪,在柯乐猪皮下脂肪和背最长肌中的表达水平均极显著低于外三元杂交猪(P<0.01),略低于柯乐猪,但差异不显著,说明LOX基因m RNA表达量与HP和LP交联呈正相关;脂肪沉积相关基因FAS、FABP1基因m RNA表达归规律在3个猪种中呈一致性,均在脂肪含量较高的组织中表达量较高,FAS和FABP1基因的m RNA在皮下脂肪中的表达量均极显著高于背最长肌。FAS基因和FABP1基因m RNA表达量较高的组织,COL3A1基因表达量高,而LOX基因表达较低。表明在脂肪沉积量较多的组织中,胶原蛋白含量高,HP和LP交联较低。4.成功克隆FAS基因和FABP1基因CDS区,构建真核表达载体p EGFP-C1-FAS、p EGFP-C1-FABP1,将测序结果与NCBI genebank中猪FAS和FABP1基因原序列进行比对,结果显示成功构建超表达载体p EGFP-C1-FAS、p EGFP-C1-FABP1。5.成功分离培养宗地花猪皮下脂肪细胞,并将重组质粒p EGFP-C1-FAS、p EGFP-C1-FABP1转染至脂肪细胞,q RT-PCR法检测COL3A1、LOX基因表达情况,结果显示:超表达FAS和FABP1基因,COL3A1基因表达量较空白对照组表达量显著或极显著增加,LOX基因表达量却显著或极显著低于空白对照组。说明脂肪沉积对COL3A1基因具有正向调控作用,对LOX基因具有负向调控作用。并在转染细胞36h后,取细胞上清进行赖氨酰氧化酶(LOX)活性检测,结果显示:LOX酶活性浓度极显著低于空白对照组。说明脂肪沉积对赖氨酰氧化酶(LOX)活性具有抑制作用。结果表明,脂肪沉积对胶原蛋白合成具有正向调控作用,且通过抑制赖氨酰氧化酶(LOX)活性从而抑制吡啶交联的产生,使胶原蛋白分子间成熟交联含量减少,改善猪肉嫩度。研究结果为保持贵州地方猪种肉质优良特性及良种选育提供理论依据。