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目的:了解黄连素（berberine,BBR）对LPS刺激下肺泡Ⅱ型上皮细胞表达促凝及纤溶抑制相关因子的调节作用并探究其可能机制。方法:1.体外培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞株RLE-6TN细胞,通过CCK-8法检测BBR对RLE-6TN细胞的毒性作用,计算半数抑制率（IC50）值,选取合理浓度进行后续实验;2.RLE-6TN细胞预先使用不同浓度BBR（20、50、80μmol/L）后予以LPS（5μg/m L）刺激24小时,蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）及实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-q PCR）实验检测细胞中组织因子（TF）、组织因子途径抑制物（TFPI）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的m RNA及蛋白表达;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）、凝血酶抗凝血酶复合物（TAT）、抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）及活化蛋白C（APC）的含量。3.细胞预先使用BBR（80μmol/L）后予以脂多糖（LPS）刺激24小时,Western Blot检测细胞中IKKα/β、磷酸化IKKα/β（p-IKKα/β）、p65、磷酸化p65（p-p65）的蛋白表达;ELISA检测细胞的p65 DNA结合力;免疫荧光检测细胞核内p65表达情况。4.采用si RNA序列沉默RLE-6TN细胞中p65基因,Western Blot验证si RNA序列沉默效率,筛选最佳序列进行慢病毒包装,通过慢病毒感染RLE-6TN细胞,构建稳定沉默p65的细胞株(p65-/-)及空白对照细胞株（NC）进行后续实验。5.在p65-/-细胞及NC细胞中分别按上述方法给与LPS和/或BBR（80μmol/L）处理,Western Blot及RT-q PCR方法检测细胞中TF、TFPI、PAI-1的蛋白及m RNA表达;ELISA检测各组细胞中PⅢP、TAT、ATⅢ及APC的含量及p65 DNA结合力。Western Blot检测细胞中IKKα/β、p-IKKα/β、p65、p-p65的蛋白表达;免疫荧光检测细胞核内p65表达情况。结果:1.BBR对RLE-6TN细胞的IC50值为81.16μmol/L。2.LPS刺激后细胞中TF、PAI-1的m RNA及蛋白表达增加,TFPI的m RNA及蛋白表达降低,细胞上清液中APC、ATⅢ含量降低,PⅢP、TAT含量增加;而通过预先使用BBR（20、50、80μmol/L）后,细胞中TF、PAI-1的m RNA及蛋白表达明显减少,TFPI的m RNA及蛋白则表达增加;细胞上清液中APC、ATⅢ含量增加,降低了PⅢP、TAT水平,BBR作用效果与其浓度呈正相关性。3.LPS刺激引起细胞内p-IKKα/β、p-p65蛋白表达增加,p65 DNA结合力明显增强,细胞核内p65蛋白表达增加,而预先使用BBR（80μmol/L）后,细胞中p-IKKα/β、p-p65蛋白表达降低;p65 DNA结合力降低;细胞核内p65蛋白表达减少。4.预先使用BBR（80umol/L）后,与LPS刺激的p65基因低表达细胞(p65-/-细胞)相比,细胞中TF、PAI-1的m RNA及蛋白表达减少,TFPI的m RNA及蛋白表达增加;细胞上清液中APC、ATⅢ含量增加,PⅢP、TAT含量降低,细胞中p-IKKα/β、p-p65蛋白表达降低;p65 DNA结合力降低;细胞核内p65蛋白表达减少。结论:黄连素在一定程度上抑制了LPS刺激的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞促凝与纤溶抑制因子的表达和分泌,促进了抗凝因子的分泌,且呈剂量依赖性;其调节作用机制可能与其抑制NF-κB信号通路活化有关。