我国畜牧养殖业发展迅速，抗生素在预防细菌感染、防治畜禽疾病方面发挥了重要作用，特别是β—内酰胺类抗生素的发展，对病原菌感染性疾病的治疗产生了革命性飞跃，抗生素已成为临床治疗病原菌感染强有力武器。但随着抗菌药物的广泛应用和滥用，耐药菌株不断增加，使抗感染治疗陷入耐药菌危机之中。不仅导致了严重的病原菌耐药性问题，而且也造成了药物残留等公共卫生隐患，降低了畜产品的品质，无法满足人们对绿色食品的需求，严重影响了我国畜产品的出口。 有鉴于此，“无毒，无残留，无耐药性”是新一代抗菌制剂的发展趋势和要求。研制和应用无毒无公害的新型抗菌剂，代替抗生素在饲料添加剂及畜禽疾病防治中的应用，已成为当前饲料学科及医学工作的一项重要内容。人们一方面对传统抗生素进行结构改造降低细菌的耐药性，另一方面不断研究和开发新型抗菌药物。近年来出现的抗菌肽(Antibacterial peptides，ABP)就是一类具有巨大发展潜力的新型抗菌药物。 抗菌肽(Antibacterial peptides，ABP)是生物体产生的一种阳离子小肽，多数具有广谱抗菌活性，是生物先天性免疫的重要组成成分。迄今为止，已在许多生物包括昆虫、鸟类、动物、植物及原核生物中发现1000多种抗菌活性肽。目前抗菌肽的制备主要有生物材料提取法、化学合成法和基因工程表达法3种。由于抗菌肽在生物组织中含量低、分离困难，除少数几种昆虫抗菌肽外，提取法制得的样品难以满足应用需要，仅用于氨基酸序列分析和初步的抗菌试验。化学合成法可得到一定数量的样品，但差错率和副反应随分子量增大而增加，一般超过50个氨基酸残基的肽段即难以用化学法合成。此法所得产品价格都相当昂贵，所以仅用于结构和性质分析及药理实验，难以应用于实际临床。由于抗菌肽结构简单、氨基酸残基未被后修饰，基因工程表达法是大量生产抗菌肽的理想途径。目前已有很多阳离子抗菌肽实现工程表达，如magainins、杀菌肽(cecropin)、buforins及其模拟肽。由于抗菌肽基因一般都较小，故采用人工合成的方法来获取目的基因，再通过基因工程方法进行微生物发酵生产抗菌肽则更具有实际意义。本研究的目的就是应用基因工程和蛋白质工程技术研制出重组家蝇防御素抗菌(des-hf)，并研究其体内外抗菌活性，为重组抗菌肽的工程化生产及其为养殖业的保驾护航奠定基础。研究主要从以下几个方面展开。 1．选用毕赤酵母偏爱密码子设计家蝇防御素抗菌肽基因的引物，用降落PCR的方法合成家蝇防御素抗菌肽的基因，全长140bp，并在其N端引入α交配信号肽kex2