论文部分内容阅读
目的:胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,其发病率居高不下并有上升的趋势,目前传统的治疗效果仍难以使人满意,严重威胁着人类的健康。要提高胃癌患者的治愈率,关键在于疾病的早期诊断。而在分子水平上探讨胃癌的发病机制,发现与肿瘤相关的肿瘤标记物,有助于胃癌的早期诊断和治疗,也有助于胃癌患者的预后,从而改善胃癌的治疗效果。microRNA是一类长约22个核苷酸组成的非编码单链小分子RNA,通过与靶mRNA3UTR碱基互补配对的方式抑制靶基因的表达或促使靶基因降解,对细胞的增殖、分化和凋亡等过程发挥重要作用。近年来相关研究表明,microRNA的异常表达与肿瘤密切相关,其在肿瘤的发生、发展中起着抑癌基因或癌基因的作用。RUNX3基因是近年来新发现的一个肿瘤抑制基因,其在小鼠胚胎发育过程及人类多种恶性肿瘤尤其是在胃癌的发生发展过程起重要作用。最近,有研究证实miR-130b与RUNX3mRNA的异常表达与肿瘤发生发展有关。miR-130b可能通过与RUNX3mRNA3非编码区结合,从而降解RUNX3mRNA或抑制其蛋白的表达。本实验通过进一步研究miR-130b和RUNX3mRNA在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,评价miR-130b对抑癌基因RUNX3表达的影响。
方法:收集温州医学院附属三院肿瘤外科2011年6月至2012年2月手术切除的40例胃癌患者的癌组织及距离癌组织5cm以上的正常黏膜组织,所有的组织学诊断经HE染色证实,术前均未进行放化疗。利用实时荧光定量PCR技术检测40对胃癌组织及其对应的癌旁正常黏膜组织中miR-130b和RUNX3mRNA的表达量。并采用免疫组织化学SP法检测40对胃癌组织及其对应的癌旁正常黏膜组织中的RUNX3蛋白的表达。
结果:1.胃癌组织中miR-130b的表达显著高于对应的癌旁正常黏膜组织(2.18±3.75vs2.59±3.45, P<0.05)。
2.胃癌组织中RUNX3mRNA表达显著低于对应的癌旁正常黏膜组织(8.76±2.82vs7.58±2.87,P<0.05)。
3.miR-130b在有、无淋巴结转移的胃癌组织中,表达的中位数分别为2.22、0.75,两者之间相比差异有统计学意义(P<0.05);在临床分期(Ⅰ+Ⅱ,Ⅲ+Ⅳ)表达的中位数分别为0.72、2.09,两者之间相比差异有统计学意义(P<0.05);而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、远处转移、有无浸润周边器官组织均无关(P>0.05)。
4.RUNX3mRNA在有、无淋巴结转移的胃癌组织中,表达的中位数分别为0.32、0.50,两者之间相比差异有统计学意义(P<0.05);临床分期(Ⅰ+Ⅱ,Ⅲ+Ⅳ)表达的中位数分别为0.54、0.33,两者之间相比差异有统计学意义(P<0.05);而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、远处转移、有无浸润周边器官组织均无关(P>0.05)。
5.miR-130b的表达与RUNX3蛋白的核表达、核+浆的表达存在负相关(P<0.05),而与RUNX3mRNA、RUNX3蛋白的浆表达无相关性(P>0.05)。
结论:1.miR-130b的高表达与胃癌患者的淋巴结转移和临床分期(Ⅰ+Ⅱ,Ⅲ+Ⅳ)有关,而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、远处转移、有无浸润周边器官组织均无关。
2.RUNX3mRNA的低表达与胃癌患者的淋巴结转移和临床分期(Ⅰ+Ⅱ,Ⅲ+Ⅳ)有关,而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、远处转移、有无浸润周边器官组织均无关。
3.miR-130b的高表达和RUNX3mRNA的低表达,与胃癌患者的预后密切相关。
4.miR-130b可能通过转录后水平减少RUNX3蛋白的表达水平促进肿瘤的发生。