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目的：探讨近红外光照射下纳米硫化铜对人宫颈癌细胞（HeLa细胞）的光热杀伤作用，并对其机制进行初步探索。 方法：以牛血清白蛋白（BSA）为生物模板合成纳米硫化铜（BSA-CuS NPs），并对其进行表征分析。采用CCK-8法检测不同浓度BSA-CuS NPs溶液（1.5,3,6,12,24,48μg/mL）对HeLa细胞和人皮肤成纤维细胞（HSF细胞）的毒性。将清洁级成年雄性昆明小鼠按体重随机分为6组，尾静脉注射不同剂量的BSA-CuS NPs溶液（0,6,12,18,24,30mL/kg），14天后用HE染色观察肝脾肾损伤情况。CCK-8法检测不同功率密度近红外线激光（0.6,0.8,1.0,1.2,1.4,1.6,1.8,2.0W/cm2）在有无BSA-CuS NPs溶液处理下对HeLa细胞活力的影响。将HeLa细胞分为对照组、硫化铜组、光照组和联合（硫化铜+光照）组，其中BSA-CuS NPs溶液的浓度为24μg/mL，近红外线激光的功率密度为1.0W/cm2。采用光学显微镜、流式细胞仪（FCM）和TUNEL实验测定不同处理组细胞的凋亡状况。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）细胞内热休克蛋白70（HSP70）的含量，FCM检测细胞内活性氧（ROS）的产生水平，酶标仪检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的表达水平。免疫蛋白印迹法（Western-blot）分析Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase3和细胞色素c（Cyt-c）蛋白的表达变化；q-PCR分析BRIC5基因和TP53基因的相对表达量。 结果：BSA-CuS NPs为直径26.25±1.86nm的片状结构，紫外线可见吸收峰位于980nm，X射线衍射（XRD）图谱与六方晶系结构硫化铜的标准图谱一致。升温曲线说明BSA-CuS NPs溶液较超纯水升温效果更加明显，呈现光照强度依赖性。24μg/mL浓度范围内培养72h，BSA-CuS NPs溶液对HeLa细胞和HSF细胞的活力无明显影响。健康成年雄性昆明小鼠尾静脉注射不同剂量BSA-CuS NPs溶液后，没有出现死亡，两周后处死小鼠，HE观察肝脾肾没有出现明显损伤。BSA-CuS NPs溶液处理过的HeLa细胞在激光照射下的细胞活力明显低于单纯的激光照射（P＜0.05）。细胞经过不同处理后，联合组细胞凋亡状况明显增强，且差异有统计学意义（P＜0.05）。联合组HSP70的表达量明显高于其他组，差异有统计学意义（P＜0.05）；联合组可诱导细胞内SOD、GSH-Px水平降低，ROS水平升高，与其余三组相比较差异有统计学意义（P＜0.05）；联合组Cyt-c和Cleaved Caspase3的表达量以及Bax/Bcl-2比值较其余三组显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05）；联合组抗凋亡基因BRIC5明显下调，促凋亡基因TP53明显增加，差异有显著性（P＜0.05）。 结论：纳米硫化铜联合近红外激光照射对HeLa细胞具有光热杀伤效应，其可能机制与自由基产生和线粒体凋亡途径有关。