蛋内注射瘦素对出雏后肉鸡肝脏胆固醇代谢的影响

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qingfeng112233
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本实验室以往的研究结果提示母鸡可通过调节瘦素在蛋内的沉积,程序化地影响后代出雏后的生长与代谢。蛋内注射leptin影响出雏后肉鸡的生长,并伴随血液脂肪酸代谢相关生化指标的变化。本研究旨在探讨蛋内注射leptin对出雏后肉鸡肝脏胆固醇代谢的影响及其可能的作用途径。1蛋内注射瘦素对肉鸡血清、肝脏胆固醇代谢相关生化指标的影响挑选蛋重相近的三黄肉鸡种蛋,随机分为三组:对照组(control)在蛋清内注射100μL溶剂(phosphate buffered saline, PBS), leptin处理组分别注射0.5μg/100μLPBS(低剂量组,Lleptin)和5.0μg/100μLPBS(高剂量组,Hleptin)的重组小鼠leptin,出雏后饲养至21日龄时采取肝脏和血清样品。用生化分析法测定肝脏及血清总胆固醇(total cholesterol, Tch),血清高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)含量。结果表明:Hleptin组肉鸡21日龄肝脏Tch和血清中Tch、HDL-C和LDL-C的含量均极显著升高(P<0.05),并且主要表现在雄性(P<0.05),雌性上述各指标与对照组相比无显著差异,但LDL-C/HDL-C比值极显著升高(P=0.00)。所有检测的指标在低剂量组均未显示显著的变化。以上结果提示:蛋内注射leptin影响出雏后肉鸡胆固醇代谢,并存在剂量和性别依赖性。2蛋内注射瘦素对肉鸡肝脏胆固醇代谢相关因子表达的影响为探讨蛋内注射leptin;是否通过影响肝脏胆固醇代谢相关因子表达而影响出雏后肉鸡胆固醇代谢,我们用实时荧光RT-PCR定量检测肝脏3-羟-3-甲基戊二酸单酰CoA还原酶(3-Hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase, HMGR)、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol-7alpha-hydroxylase, CYP7 A1)、低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor, LDLR)和固醇调节元件结合蛋白(sterol regulator element-binding protein 2, SREBP-2) mRNA,并用Western blot方法测定肝脏SREBP-2的蛋白含量。结果表明:Hleptin组和Lleptin组雌性肉鸡肝脏的HMGR和CYP7A1 mRNA水平均显著低于对照组(P<0.05);蛋内注射高剂量和低剂量的leptin均能显著降低21日龄肉鸡肝脏SREBP-2 mRNA.表达(P<0.05),并不表现明显的性别差异;但肝脏中SREBP-2蛋白含量的变化与mRNA并不吻合,高剂量组肝脏SREBP-2蛋白含量有增加趋势(P=0.078),其中雄性与对照组相比极显著增加(P=0.009),而低剂量组肝脏中SREBP-2的蛋白含量无变化。以上结果表明:蛋内注射leptin可影响肉鸡出雏后快速生长期肝脏胆固醇代谢相关基因的表达。高剂量组雄性肉鸡肝脏中较高的SREBP-2蛋白含量与其肝脏和血清中高胆固醇水平相吻合。但转录水平的变化正好相反,leptin处理组肉鸡肝脏SREBP-2和HMGR转录均表现下调,这可能与胆固醇的反馈调节有关,也说明SREBP-2的转录和翻译存在不同的调节机制。此外,蛋内注射Leptin对肉鸡肝脏胆固醇合成和转化相关基因的调节也存在剂量和性别依赖性。
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