研究背景胰腺癌恶性程度高、预后差,吉西他滨是治疗胰腺癌的一线化疗药物,对部分病人具有疗效好、毒副作用小等特点,但总体应答率和患者存活率尚不理想。这是由于许多患者在治疗过程中对吉西他滨产生了获得性耐药。破译吉西他滨耐药的分子机制对于寻找突破当前治疗瓶颈的新靶点具有重要意义。基于PDTX模型筛选,发现SGK1与吉西他滨耐药相关。SGK1是丝氨酸/苏氨酸激酶家族中的一员,与胶质母细胞瘤、结直肠癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌等恶性肿瘤的发生和发展密切相关。SGK1可以促进肿瘤对AKT抑制剂、紫杉醇、替莫唑胺等药物化疗耐药。但SGK1在胰腺癌中的功能及机制尚无报道,与吉西他滨化疗耐药的关系也不明确。研究目的探究SGK1在胰腺癌中的表达,及其对胰腺癌细胞化疗耐药、克隆形成、增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响,探究其影响胰腺癌对吉西他滨化疗敏感性的机制,为胰腺癌化疗耐药机制的研究提供新的思路,同时为寻找胰腺癌新的治疗靶点提供理论依据。研究方法我们首先通过免疫组织化学染色、RT-qPCR、Western Blot检测SGK1在胰腺癌组织及细胞系中的表达水平,通过RT-qPCR检测SGK1在胰腺癌亲本株与吉西他滨耐药株中表达水平。其次,我们根据SGK1在胰腺癌中的表达水平构建SGK1敲低及过表达细胞系模型,通过平板克隆实验、CCK-8、Annexin V、Transwell和细胞划痕实验等检测SGK1对胰腺癌细胞耐药、增殖、迁移和凋亡能力的影响。然后我们通过细胞转录组测序以及生物信息学分析,探究SGK1可能的下游靶点,并通过体外实验验证。最后我们通过Western Blot探究SGK1调控胰腺癌对吉西他滨化疗敏感性的下游通路。研究结果免疫组织化学染色提示SGK1在胰腺癌组织中表达高于癌旁正常组织,与胰腺癌不良预后相关。RT-qPCR提示SGK1在耐药细胞株中表达高于亲本株,且在吉西他滨的诱导下SGK1表达水平升高。进一步体外实验表明敲低SGK1可抑制胰腺癌细胞增殖、迁移,促进凋亡,而过表达SGK1可促进胰腺细胞克隆形成、增殖、迁移,并抑制凋亡。通过转录组测序和生物信息学分析,我们发现HMGB2是SGK1可能的下游靶点,体外实验表明敲低HMGB2可减弱胰腺癌细胞的增殖能力,并增加吉西他滨敏感性。拯救实验表明,过表达SGK1的同时敲低HMGB2可降低SGK1对吉西他滨化疗敏感性的调控作用。通过Western Blot发现敲低或过表达SGK1后mTOR、NF-κB的磷酸化水平显著改变,敲低HMGB2后NF-κB的磷酸化水平显著改变。研究结论SGK1在胰腺癌中表达升高,与患者不良预后和吉西他滨获得性耐药相关。SGK1可提高HMGB2的表达水平,进而提高NF-κB的磷酸化水平,从而促进胰腺癌对吉西他滨耐药;SGK1还可提高mTOR的磷酸化水平,并促进胰腺癌细胞增殖、迁移和生存能力。