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鸡滑液囊支原体感染是由滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起的,鸡和火鸡的一种急慢性传染病,其临床以病鸡关节或足垫肿大、滑液囊和腱鞘发炎为主要特征,也可引起呼吸道疾病及气囊炎,严重的引起全身性感染,也可导致新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、大肠杆菌等病原微生物的混合或继发感染。该病在世界范围内流行,多个国家的流行病学监测表明MS在商品代鸡群中有很高的流行率。近几年滑液支原体在中国的发病率有增多趋势,很多地区季节性发病相当严重。MS感染鸡群可导致跛行、产蛋量下降、生长发育迟缓及酮体降级等危害,严重影响鸡的生产性能,给世界商品养鸡产业造成巨大的经济损失。本研究从江苏某鸡场收集病鸡,对其进行支原体分离,获得一株疑似支原体的分离物,通过菌落观察、血清学实验、支原体16S r RNA通用引物测序鉴定及与实验室标准株MS WVU1853差异性鉴定,确定该分离物为滑液支原体,且不同于本实验室的MS标准株(MS WVU1853),因此将其命名为JS1株。本研究对滑液支原体SPF鸡攻毒模型进行了初步探索,将分离株MS JS1对21日龄SPF鸡进行攻毒,分别采用关节注射、肌肉注射、足垫注射和滴鼻四组不同攻毒方式,每组10只SPF鸡,攻毒剂量为每只1×109 CCU。结果表明攻毒方式不同,其发病率也不一致,其中关节攻毒组发病率最高,达9/10,其后依次是足垫攻毒组发病率为8/10,滴鼻攻毒组发病率为4/10,肌肉攻毒组发病率为0。除肌肉攻毒组无发病症状外,其余三种攻毒方式均能引起不同程度的特征性病变,即鸡关节囊肿、足垫肿大、胸部皮下囊肿、跛足以及鸡冠苍白等,对发病鸡部分剖检也能从关节、足垫或肺组织中分离到滑液支原体。针对滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)的pdh A基因,鸡毒支原体(Mycopl asma gallisepticum,MG)的gap A基因,大肠杆菌(Escherichia coli,EC)的pho A基因,沙门菌(Salmonella,SA)的inv A基因分别设计2-3对特异性引物,通过筛选引物组合、优化体系条件,最后确定了一组最优引物组合和反应体系,建立了针对这四种禽常见致病菌的多重PCR检测方法。特异性实验证明该方法能特异性扩增出MS、MG、EC和SA的目的片段,其他非相关的禽致病菌则无扩增产物。敏感性检测发现MS和MG的检测灵敏度均达到1×102 CCU/反应,EC的检测灵敏度1×102 CFU/反应,SA的检测灵敏度1×103 CFU/反应。临床感染组织样本检测结果显示,多重PCR检测结果与分离鉴定结果一致,检测率可达83.8%。本实验对MS分离株JS1进行了分离鉴定,初步建立了滑液支原体对SPF鸡的攻毒模型,并成功建立能同时检测禽常见致病菌MS、MG、EC和SA的多重PCR检测方法,为滑液支原体感染流行病学调查研究以及进一步开展滑液支原体疫苗的研制奠定了基础。