细胞自噬(autophagy)是真核细胞中基本的生命现象,在清除细胞内代谢废物和维持细胞稳态过程中发挥着重要的作用。有研究表明,自噬与癌症等多种疾病的发生发展有着密切的联系。细胞自噬的研究通常需要外界条件刺激介导自噬水平,如饥饿、运动、自噬调节剂等。为了探究自噬调节剂对小鼠肺组织自噬,及运动对于JSRV裸鼠皮下移植瘤生长的影响,本试验进行了如下研究:(1)筛选自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin,RAPA)调节肺组织自噬的最适给药剂量。将18只昆明小鼠随机分为3mg/kg组、5mg/kg组、7mg/kg组、9mg/kg组、11mg/kg组和对照组,每日腹腔注射RAPA注射液,对照组注射等量生理盐水。每日记录小鼠体重,给药28d后处死小鼠,取肺组织提取蛋白。通过蛋白免疫印迹试验(Western blot,WB)检测自噬标志蛋白LC3-II与LC3-I的蛋白表达水平。结果显示:RAPA对小鼠体重没有显著影响。RAPA各给药组与空白对照组相比,5mg/kg和7mg/kg组LC3-II/I的比值显著高于空白对照组(P<0.05)。因此,5～7mg/kg的RAPA注射液对小鼠肺脏组织的自噬诱导效果最好。(2)筛选自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)调节肺组织自噬的最适给药剂量。将18只昆明小鼠随机分为3mg/kg组、5mg/kg组、7mg/kg组、9mg/kg组、11 mg/kg组和对照组,并且每日腹腔注射相应剂量的3-MA注射液,对照组注射等量生理盐水。每日记录小鼠体重,给药28d后,处死小鼠,取肺组织提取蛋白。通过WB对3-MA各给药组中自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ的蛋白表达水平进行检测。结果显示:3-MA对小鼠体重没有显著影响。3-MA各给药组与空白对照组相比,5mg/kg组的LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值显著低于空白对照组(P<0.05)。3-MA各给药组中5mg/kg组的LC3-Ⅱ/Ⅰ比值最低。因此,5mg/kg的3-MA注射液对小鼠肺脏组织的自噬抑制效果最好。(3)为了探讨运动对于小鼠肺脏自噬水平的影响。将6只昆明小鼠随机分为运动组和对照组,运动组每日强制于疲劳转棒仪以25r/min运动30min,对照组不做任何处理。试验21d后,处死小鼠,取肺组织提取蛋白。通过WB对各组中自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ的蛋白表达水平进行检测。结果显示:运动未能对小鼠体重产生显著影响,但运动能显著增加小鼠肺脏组织自噬水平。(4)为了探讨运动对于裸鼠移植瘤生长的影响。在12只NUNU/B裸鼠右侧肩胛皮下注射0.2 mL 2×106个JSRV env慢病毒转染72h后的NIH3T3细胞悬液,构建皮下移植瘤模型。对裸鼠进行随机分组,分为对照组、运动组,共2组,每组3只。待成瘤后,运动组每日放入疲劳转棒仪中25r/min运动30min,对照组不做任何处理。试验21d后处死小鼠,剥离皮下肿瘤块,记录其长径(a)和短径(b),通过公式TV=1/2·a·b2计算其体积。结果显示:运动组的肿瘤大小显著小于对照组的肿瘤大小,以上结果表明运动能显著抑制JSRV裸鼠皮下移植瘤的生长。