毕赤酵母基因操作技术的改进i一种抗原制备及抗体纯化的新技术

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fine_yhy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
该文通过在通常筛选重组子的MD培养基中增添1M山梨糖醇使毕赤酵母电穿孔转化效率提高10倍以上.作者们还分析了其他影响电穿孔转化效率的因素,如毕赤酵母生长状况即OD<,600>,不同的整合位点(BglII,SacI,SalI,StuI),以及不同的毕赤酵母受体菌(GS115和KM71)等.该文描述的转化方法所能达到的转化效率比目前大多数文献报道的效率明显要高,可达每微克质粒DNA产生的整合到受体染色体上的转化子为2.8*10<3>个,而且该文所制作的感受态细胞可以保存三周而不影响电穿孔的转化效率.作者们除了探索出一种简便、高效的转化方法,另外还建立了一种稳定、可靠的毕赤酵母菌落PCR方法.为了进一步检验作者们所的电穿孔转化方法和菌落PCR方法,测试这两种方法在毕赤母外源蛋白表达上的应用,借助这两种方法,作者们成功地把小蛭素基因整合到毕赤母的染色体上,并实现了小蛭素的分泌表达,分泌的小蛭素占培养上清的15i以上,约每毫升培养上清20ug,其生物活性达每毫升培养上清82个国际单位.
其他文献
细菌表面相关物质(Surface Associated Material,SAM)是存在细菌表面与细菌细胞壁疏松结合的荚膜物质,其主要成分是多糖和蛋白质.SAM是一种可溶性物质,极易从细菌表面逸出扩
TGFβ信号通路在肿瘤的发生和进展过程起到非常重要的作用,而TGFβ信号功能的复杂性主要通过其下游信号分子SMADs产生的。SMAD7作为TGFβ信号上调表达的抑制性SMAD,在TGFβ信号
由于转子无永磁体、制造成本低,无轴承磁通切换电机(BFSPM)作为一种定子永磁式的电机,在医疗卫生、生化反应等需要一次性抛弃或需要处理高温流体等应用场合具有独特的优势。本文以磁通切换电机类型为研究对象,对其无轴承化技术做了探讨与研究。本文根据磁通切换和麦克斯韦力的原理分别阐述了电机产生转矩和悬浮力的机制,探究了悬浮力与转子转角之间的关系,通过对电机悬浮力的数学建模,文章推导了两种悬浮力的控制策略,
已知以Ca--CaM 为核心的钙信使系统对某些植物的交叉适应具有调控作用,而细胞质和细胞核CaM对细胞内生理生化过程的调控又各有侧重,因此,准确的区分受细胞质CaM和细胞核CaM调
该研究以左家自然保护区及土门岭地带的典型次生林要区为研究地点,运用GPS定位系统,采用样带法、巢位定点法、领域映射技术等多种研究方法,对样地中的鸟类物种多样性、种群动
随着化石能源日益紧缺,节能减排问题越来越受到世界各国关注,这使得微电网和电动汽车等领域蓬勃发展。微电网和电动汽车大量使用双向DC/DC变换器来解决储能和能量双向流动的问题,对其进行研究具有重要意义。双向谐振变换器相比于传统变换器具有工作频率高、开关损耗小、EMI噪声小等优点,受到国内外专家和学者的青睐。针对谐振变换器输出电流纹波大的问题,本文选用结构为输入并联、输出并联的半桥谐振变换器,并对其进行
该研究在了解和综述人工和天然雌核发育鱼类及其相关研究的现状和进展有的基础上,以所在实验室在人工雌核发育鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)和天然雌核发育银鲫(Carassi
我认为经济企稳回升的基础尚不牢固,反弹只是阶段性的、局部的,整个经济的恢复还需要较长的一段时间。目前中国经济中仍然存在着许多亟待解决的问题,需要引起高度重视,否则已
一、设计和筛选单链阻遏蛋白的高亲和力DNA结合序列.单链阻遏蛋白RR噬菌体434阻遏蛋白的衍生物,它是噬菌体434阻遏蛋白的N端DBD()1-69位氨基酸组成的共价二聚体.这个单链分子
该文进行了在无溶剂体系中,假单胞杆菌脂肪酶催化不对称酯合成反应,拆分2-辛醇的研究.根据此反应体系对系统水含量的要求,我们选择水合盐对NaPO(10/0)控制最佳系统水含量,讨