兔自体富血小板血浆对膝关节软骨损伤修复作用的生物力学研究

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目的:膝关节软骨损伤后可以导致明显的膝关节软骨的退变,严重影响膝关节功能,从而影响生活质量。虽然现在对骨关节炎的治疗方法众多,但是关节软骨本身的再生能力较弱。因此如果可以修复损伤的软骨则可以避免关节的退变。软骨损伤后所引起胫股关节异常的生物力学特性是导致膝关节退变的原因之一。关节镜下进行微骨折钻孔减压目前是应用最为广泛的手术方式。但手术方法为有创方法,且术后恢复需要长期制动,防止新生纤维软骨脱落。近年来,很多学者对膝关节软骨损伤后关节内注射自体富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)进行研究,其内含有的多种生长因子对软骨细胞增殖和细胞外基质合成具有促进作用。采用不同方法修复损伤的关节软骨的效果各家报道不一。但对于采用PRP对膝关节软骨损伤修复作用的生物力学研究的报道很少。本实验通过生物力学实验探讨采用兔自体PRP修复损伤的内侧胫股关节软骨后其膝关节生物力学特性变化,从而为临床提供理论依据及指导意见。本实验通过研究兔自体PRP修复损伤的内侧胫股关节软骨后膝关节接触面积、压强的变化,来比较实验组与对照组之间术后不同时间膝关节生物力学特性的改变。方法:随机选取18只健康试验用新西兰大白兔作为实验对象。于每只兔耳中央动脉抽血后离心,去除下层红细胞及上层多余血浆,置于冰箱后备用。将兔麻醉后手术造成膝关节股骨负重区内侧软骨损伤模型,大小约2mm×3mm,厚度约0.3mm,取制备好的0.5mlPRP注入右膝内,加入凝血酶及葡萄糖酸钙后缝合膝关节。左膝为对照,造成软骨损伤后注射生理盐水后缝合膝关节。兔苏醒后无制动措施,分别于术后1周、3周、5周随即处死6只,观察软骨变化,截肢冷冻备用。另随机选取6只健康实验用新西兰大白兔,处死后行膝关节手术,造成软骨损伤模型6个作为软骨损伤组,完整膝关节6个作为完整组,截肢冷冻备用。将共48例兔膝关节于实验前一天常温解冻,去除膝关节内、外侧半月板及多余软组织,切断前后交叉韧带,固定于生物力学试验机,以速度为5mm/min,最大50N的压力,采用Prescale感压纸测试膝关节内外侧关节面压强及接触面积,关节接触面积的计算采用Auto CAD软件多线段圈定不规则图形进行面积测量,所受压强则由富士公司提供的压力读取器进行读取。结果:大体标本观察所见术后1、3周,注射PRP组缺损软骨处可见新生软骨组织,表面略粗糙,缺损区边界未消失;术后5周注射PRP组受损软骨处新生软骨组织修复完整,软骨表面光滑有光泽,缺损区边界消失;注射生理盐水组术后1周未见明显软骨修复,术后3、5周仍可见软骨缺损,缺损处增生,边缘轻微骨赘形成,软骨退变。生物力学测试可见,软骨缺损组与完整组相比内侧胫股关节接触面积增加,外侧减小,差异有统计学意义(P<0.05);而压强在超负荷时内侧差异没有统计学意义(P>0.05),外侧差异有统计学意义(P<0.05)。注射PRP组膝关节与完整组相比在胫股关节内、外侧接触面积方面于术后5周差异无统计学意义(P>0.05);在胫股关节内、外侧压强方面于术后3、5周差异无统计学意义(P>0.05)。注射NS组与完整组相比在胫股关节内、外侧接触面积方面于术后1、3、5周差异均有统计学意义(P<0.05),且术后5周内、外侧接触面积之间差异明显(P<0.05);在胫股关节内、外侧压强方面NS组与完整组相比术后5周差异有统计学意义(P<0.05),且内侧所受压强大于外侧(P<0.05)。结论:第一,兔胫股关节内侧软骨损伤后膝关节处于高负荷下其压力分布改变,未采取有效措施进行修复,其接触面积及压强增加,接触压力增加,5周后出现轻度内翻畸形。第二,兔膝关节软骨损伤后使用PRP可以修复受损软骨,新生软骨组织于5周时恢复正常膝关节软骨组织的接触面积及接触压力。
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