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研究背景:近年来,随着社会生活方式的改变,人乳头瘤状病毒（Human Papilloma Virus HPV）感染人数增多,宫颈癌的发病率明显上升[1],其发病率和死亡率均居我国女性恶性肿瘤排名第4位[2]。我国宫颈癌的发病率和死亡率甚至高于北美发达国家[3,4]。妇科恶性肿瘤现阶段最主要的治疗手段是手术治疗,并辅以放疗和化疗以降低患者术后复发率、提高生存率。但传统治疗方法仍存在创伤大、特异性差等问题,新的肿瘤治疗方法亟待被发现并走向临床应用。肿瘤在发生、发展的过程中,往往能逃避,甚至抑制机体的免疫系统对其识别和发挥杀伤作用,调动机体免疫系统以对抗肿瘤细胞始终无法取得突破性进展,然而随着对肿瘤微环境和肿瘤免疫逃逸机制的深入了解,学者们发现通过抑制介导肿瘤免疫逃逸的相关信号通路可极大程度地逆转肿瘤免疫逃逸。程序性死亡受体-1（Programmed Cell Death-l,PD-1）/程序性死亡因子配体1（Programmed Death Ligand-1,PD-L1）信号通路作为介导肿瘤免疫逃逸的重要通路之一备受关注。PD-LI是共刺激分子的B7超家族的一分子,主要在抗原提呈细胞、活化的T淋巴细胞及B淋巴细胞、炎症反应细胞和恶性肿瘤中表达,具有抑制T淋巴细胞活化的功能。PD-L1通过与其受体PD-1结合后可以提供负性调控信号,抑制T细胞的活化和增殖,促进T细胞凋亡,使肿瘤发生免疫逃逸[5-8]。目前已经发现PD-L1在肺癌、肝癌、乳腺癌及宫颈癌等恶性肿瘤中均呈高表达。一旦肿瘤细胞中PD-L1表达上调便可以增加肿瘤灶的转移性和侵犯性,并且使肿瘤细胞能逃避CD8+T细胞的攻击。因此PD-L1在肿瘤的免疫逃逸中起重要作用[9],不仅参与肿瘤的发生、发展,还与肿瘤的侵润转移也存在关联[10]。目前FDA批准用于临床的两类免疫疗法是:（1）PD-1/PD-L1抗体;（2）细胞毒性T细胞淋巴细胞相关的抑制剂蛋白-4（Cytotoxic T cell Lymphocyte-Associated inhibitor protein-4,CTLA-4）抗体[11]。目前靶向PD-1或PD-L1的抗体已应用于多种恶性肿瘤,包括黑色素瘤、NSCLC、肾细胞癌、膀胱癌、结直肠癌和胃癌的治疗,且客观缓解率达16%100%,肿瘤组织PD-L1表达可作为单克隆抗体疗效预测的指标。本实验通过检测PD-L1在宫颈癌组织中的表达情况,为宫颈癌免疫治疗提供有价值的参考。目的:检测正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（Cervical Intraepithelial Neoplasias,CIN）组织、宫颈癌组织中PD-L1的表达,探讨其与宫颈病变程度及宫颈癌患者临床病理参数的关系,为宫颈癌免疫治疗提供理论和实验基础。方法:1.使用免疫组织化学染色的方法检测10例正常宫颈组织、71例CIN组织和89例宫颈癌组织中PD-L1蛋白的表达情况。用卡方检验分析PD-L1表达水平与宫颈癌患者临床病理参数（临床分期、病理类型、年龄、淋巴结转移）的关系。2.收集了10例无HPV感染、38例高危型HPV感染的女性宫颈脱落细胞灌洗液并使用ELISA试剂盒对灌洗液中的可溶性PD-L1（Soluble PD-L1,sPD-L1）进行了快速检测。结果:1.PD-L1在正常宫颈组织中不表达,在CIN和宫颈癌中均有表达,其阳性率分别为42%（30/71）和75%（66/89）。CIN中PD-L1表达的免疫评分较低,呈弱阳性,宫颈癌中PD-L1表达免疫评分高,呈强阳性。设置P<0.05,其差异有统计学意义。PD-L1的表达水平与宫颈癌患者的年龄、病理分级、淋巴结转移无关（P>0.05）,而与患者临床分期密切相关（P=0.0021）,PD-L1在III-IV期宫颈癌组织中表达最高。2.高危险HPV感染的女性往往具有更高的sPD-L1表达。结论:1.PD-L1在正常宫颈组织癌变的发生、发展过程中逐渐上升趋势,说明其在宫颈癌的免疫抑制中发挥重要作用,可为宫颈癌的免疫靶向治疗提供思路。2.对宫颈脱落细胞灌洗液中的sPD-L1进行快速检测或可辅助临床医生对患者HPV感染状态进行更好地评估,甚至预测临床预后。