白斑综合征病毒（White spot syndrome virus,WSSV）是一种对虾高致死率病毒。自该病毒爆发以来,全球对虾养殖行业的经济损失高达150亿美元,目前尚无有效方法能够防控该病毒。本实验室已将WSSV的主要囊膜蛋白VP28转入蓝藻中并成功表达,实验结果表明该转基因蓝藻可以有效保护对虾免受WSSV危害。本学位论文将WSSV上另一种主要的囊膜蛋白VP19和融合蛋白VP（19+28）的基因分别转入聚球藻7942（Synechococcus sp.PCC 7942）中,比较研究转vp19、vp28和vp（19+28）基因型蓝藻对对虾幼苗的保护效果,并对免疫机制进行初步探索。主要结果如下:（1）转vp19,vp（19+28）基因聚球藻构建与筛选以WSSV为模板,设计全长引物后通过PCR扩增得到目的基因片段,经测序验证正确后转入质粒p RL-489中。通过三亲接合转移将含有目的基因片段的p RL-489质粒、穿梭质粒p RL-542和野生型聚球藻7942混合后涂布在BG-11（+N）平板上。将生长出来的藻转到含有卡纳抗生素的平板上进行固体平板筛选,后转移到含有卡纳抗生素的液体培养液中梯度筛选,初步得到转vp19和vp（19+28）型聚球藻7942。（2）转基因聚球藻7942的vp19和vp（19+28）基因表达效率及光合生理特性研究使用RT-PCR和Western Blot法检测转vp19和vp（19+28）型聚球藻7942,结果表明vp19和vp（19+28）在分子和蛋白水平都能成功表达。为提高转基因藻的生长效率和目的基因表达效率,采用液相氧电极来测定转vp19和vp（19+28）型聚球藻7942的光合生长速率,得到最适生长条件为:温度38℃,光照强度2 500 lx,p H8.0,盐度0 mol/L Na Cl。同时得出采收天数是决定目的基因表达的关键因素,进入对数生长后期的转vp19基因型聚球藻7942表达率最高,可达到9.2%,VP19蛋白产率达到7.3 mg/L;进入对数生长期前期的转vp（19+28）基因型聚球藻7942表达率可达到7.6%,VP（19+28）蛋白产率达到6.9 mg/L。（3）转基因聚球藻投喂南美白对虾幼苗药效研究WSSV攻毒实验结果表明,口服的转vp19,vp28,vp（19+28）基因型聚球藻7942均可提高对虾的增长速率,并提高感染WSSV后的存活率,这是“药食同源”的有力证明。Vp（19+28）组最高成活率与vp19和vp28组相比,分别提高8.9%和13.3%;vp19组对幼虾抵抗WSSV的保护率低于vp28组,但vp19组的死亡趋势慢于vp28组。因此,我们推测二价VP（19+28）的防护率优于VP19和VP28,而VP19的长期防护率优于VP28。酶活试验结果表明,WSSV感染后,试验组的酚氧化酶（PO）最终酶活性显著高于阳性对照组（P＜0.05）;WSSV感染组在8小时内超氧化物歧化酶（SOD）活性显著下降,在48 h时,试验组的SOD活性明显高于阳性组（P＜0.05）;过氧化氢酶（CAT）活性变化与SOD活性变化一致,最后实验组的酶活明显高于阳性对照组的酶活（P＜0.05）;WSSV感染组的溶菌酶（LYZ）活性随感染时间的变化先升高后降低,72 h后各组LYZ活性明显低于阴性对照组（P＜0.05）。上述结果证明了转vp19和vp（19+28）型聚球藻7942构建成功,vp19和vp（19+28）型聚球藻都能够增强口服免疫的幼虾相关免疫酶活性,且vp（19+28）型聚球藻的保护率优于转vp19和vp 28型聚球藻,我们推测口服转基因聚球藻可以增强其生长性能、抗氧化能力,进而减轻WSSV引起的氧化应激和免疫抑制,从而达到“药食同源”的作用。另外,本研究进一步探索了转基因藻的最适生长条件,探索不同环境因素对聚球藻的生长影响,从而可以提高转基因聚球藻的生长活性,为藻种传代规模培养奠定基础;且通过RT-PCR检测目的基因在聚球藻7942种不同生长阶段的表达,确定了转基因藻的最佳采收时间,避免盲目收集,节约了培养的成本,还可以为对虾攻毒实验的转基因藻的用药剂量提供依据。