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CXCL8是一种 CXC型趋化因子，是动物免疫应答调控体系的重要组分之一。CXCL8可以由多种细胞分泌产生，例如，在哺乳动物中它可以由巨噬细胞、单核细胞、上皮细胞和中性粒细胞等分泌产生。它可由细胞因子白介素1β（IL-1β)和肿瘤坏死因子α（TNF-α)诱导表达。CXCL8对巨噬细胞、嗜碱性粒细胞、T淋巴细胞，NK细胞等细胞有趋化作用。本研究克隆了香鱼 CXCL8(PaCXCL8l)基因的cDNA序列，它由872个核苷酸组成，编码一个由95个氨基酸组成的、分子量为10.41 kDa的目的蛋白。它的基因组DNA序列由1277个核苷酸组成，包括四个外显子和三个内含子。PaCXCL8l与已知的鱼类 CXCL8结构相似，N端19个残基为信号肽序列。序列对比表明，PaCXCL8l与大西洋鳕鱼的CXCL8氨基酸相似性最高，为83％。荧光定量 P C R检测发现，健康香鱼的PaCXCL8l的mRNA主要在头肾和脾组织中表达，此外 PaCXCL8l在体外培养的头肾来源的单核巨噬细胞也有高表达。鳗利斯顿氏菌感染以后，PaCXCL8l在肝、脑、鳃、头肾、心、脾和单核巨噬细胞均表达上调。随后原核表达了PaCXCL8l，用 Ni2+亲和柱纯化PaCXCL8l蛋白，利用尿素梯度稀释法复性蛋白，制备小鼠多抗。Western blot检测发现 PaCXCL8l蛋白在鳗利斯顿氏菌感染后的香鱼单核巨噬细胞表达上调。进而研究纯化复性的PaCXCL8l蛋白对中性粒细胞和单核巨噬细胞的趋化效果，发现 PaCXCL8l蛋白可趋化中性粒细胞和单核巨噬细胞，分别在0.1μg/ml和1.0μg/ml达到最大趋化效果。随后，香鱼腹腔注射 PaCXCL8l蛋白，可有效增加腹腔中性粒细胞和单核巨噬细胞的数量。此外，PaCXCL8l蛋白体外处理中性粒细胞和单核巨噬细胞，发现两种细胞 IL-1β、TNF-α和IL-10三种细胞因子均表达上调。通过上述实验，我们明确 PaCXCL8l蛋白通过对嗜中性粒细胞作用，参与机体的炎症反应和免疫调节。该工作为进一步深入研究 CXCL8在鱼类抗细菌免疫中的作用奠定了基础。