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真姬菇又名白玉、海鲜菇,是一种营养丰富的食用兼药用的珍稀食用菌,也是近年来风靡日本市场,深受消费者青睐的食用菌珍品。该菇形态美观,质地脆嫩,味道鲜美,现已成为全国食用菌工厂化生产的重要品种之一。真姬菇在工厂化生产中存在着栽培周期长(120-150d)、栽培条件苛刻、抗逆性差、产品品质参差不齐等问题,在一定程度上限制了其规模化发展。漆酶具有降解木质素,氧化降解酚类物质,抑制杂菌,改善出菇品质等作用。本研究以漆酶活性较高的云芝和无漆酶活性的真姬菇作为实验材料,采用酶学与原生质体融合相结合的技术,将云芝原生质体经高温灭活与真姬菇原生质体融合,从而得到的高漆酶活性的真姬菇优良品种。本文从9个不同品种的真姬菇菌种,通过在平皿中比较菌丝生长速度、菌丝浓密、长势,筛选出生长速度快、菌丝致密、长势旺盛的白玉作为出发菌株；从9个不同品种的灵芝菌种,通过比较各菌种在RB亮蓝-PDA中的变色圈和变色速度,筛选出变色圈大和变色速度强的云芝作为出发菌株。然后以筛选得到的白玉和云芝作为出发菌株,对它们进行原生质体制备、再生的实验,结论如下：白玉原生质体制备和再生最佳条件是：2%溶壁酶处理3h,RM2为再生培养基；云芝原生质体制备和再生的最佳条件是：3%的溶壁酶酶解3h,RM2为再生培养基。接着,将制备好的云芝原生质体采用55。C水浴45min灭活后,同白玉的原生质体按1：1混合,在32℃下以PEG(4000)为融合剂,处理25min。在再生培养基上生长的融合菌株,采用RB-PDA平板显色技术,筛选出变色圈大和变色速度强的合菌株RH01-RH04。随后比较它们同出发菌株白玉和云芝漆酶活性的差异,复筛出高漆酶的融合菌株RH01。对合菌株RH01-RH04进行拮抗实验,显示融合菌株RH01-RH04同出发菌株间白玉和云芝之间都有明显的拮抗现象,表明它们之间存在不亲和性,初步鉴定属于融合的新菌株。应用RAPD技术和ISSR技术进一步分析,根据扩增的DNA图谱,表明融合菌株RH01～RH04的亲缘关系比较接近白玉,同云芝的遗传差异比较大。融合菌株RH01～RH04连续转接5代后的稳定性显示RH01的稳定性最好。融合菌株RH01生长特性的实验表明：RH01的菌丝形态介于出发菌株白玉和云芝之间；在16x40倍的普通显微镜下观察,菌丝也存在差异；进行霉菌抗耐能力比较,RH0l的拮抗圈最大,表明它的对霉菌抗耐能力最强。生物学特性试验结果：融合菌株RH01的培养基优化试验结果表明在PDA胡萝卜培养基上生长旺盛,活力较强,菌丝浓密、洁白；融合菌株RH01的最适的生长温度为26。C；最适pH值为7.0；RH01在种子瓶中菌丝生长速度为0.31cm/d；出菇实验表明生产周期比白玉短,产量也平均高出2.62g/瓶。