肿瘤、缺血及炎症等诸多疾病都会在病变部位产生酸性的细胞外微环境,这种细胞外微酸环境也为这些疾病的诊断和治疗提供了新的契机。酸响应肽（The pH low responsive peptide,p HLIP）可在酸性微环境下自发折叠成跨膜螺旋插入并跨过细胞膜,为靶向这些酸性组织提供新的机会。程序性死亡受体1（Programmed death 1,PD-1）是一种在活化的T细胞中诱导的抑制性受体。其配体PD-L1和PD-L2与PD-1的结合维持了外周免疫耐受。目的:本研究将母本p HLIP（WT p HLIP）N端与小鼠细胞程序性死亡配体1（Programmed death ligand 1,PD-L1）胞外段C端通过（G4S）3连接子连接后得到重组融合蛋白—m PD-L1-WT p HLIP,并对其功能进行鉴定,为m PD-L1-WT p HLIP蛋白后续应用于自身免疫病的治疗奠定基础。方法:设计m PD-L1-WT p HLIP及对照蛋白（m PD-L1-m Fc等）碱基序列,通过HEK293细胞真核表达系统表达相关蛋白,通过尺寸排除色谱法（size exclusion chromatography,SEC）及聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDSPAGE）对蛋白分子量及纯度进行检测。利用ELISA,FACS检测m PD-L1-WT p HLIP与m PD-L1抗体和重组m PD-1蛋白以及细胞膜上表达的m PD-1分子的结合活性。通过FACS、免疫荧光检测验证m PD-L1-WT p HLIP在酸性溶液中的膜插入性及其与重组m PD-1蛋白的结合活性。细胞实验评价m PD-L1-WT p HLIP的免疫抑制功能并明确其作用机制。结果:（1）成功获得纯度较高m PD-L1-WT p HLIP蛋白及对照蛋白;（2）m PDL1-WT p HLIP与抗m PD-L1抗体和重组m PD-1蛋白以及膜上m PD-1分子结合活性良好;（3）m PD-L1-WT p HLIP具有良好的酸响应性;（4）固相或酸性溶液中m PD-L1-WT p HLIP能够显著抑制淋巴细胞的增殖和IFN-γ分泌,其作用是由PD-1/PD-L1通路所介导。结论:重组蛋白m PD-L1-WT p HLIP具有良好的酸响应性和免疫抑制功能。