【摘 要】
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为了研究14-3-3ε、γ在神经细胞分化中的作用,我们用pEGFP-14-3-3ε、γ转染PC12细胞,并以pEGFP空载体为对照.结果发现,过表达pEGFP-14-3-3ε、γ的PC12细胞发生了明显的分
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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为了研究14-3-3ε、γ在神经细胞分化中的作用,我们用pEGFP-14-3-3ε、γ转染PC12细胞,并以pEGFP空载体为对照.结果发现,过表达pEGFP-14-3-3ε、γ的PC12细胞发生了明显的分化,有神经突起的生长.此外,我们将pEGFP、pEGFP-14-3-3ε在培养的大鼠神经干细胞中过表达,结果发现,过表达pEGFP的神经干细胞仍然保持紧密成团的状态,形成神经干细胞球,形态没有发生变化,而过表达pGFP-14-3-3ε的神经干细胞形态发生了显著的分化,不仅细胞迁移,而且有明显的神经突起的生长.结果说明,14-3-3ε、γ能够促进神经细胞的分化.然而,当我们以pEGFP空载体为对照,将pEGFP-14-3-3 η在PC12细胞中过表达时,发现过表达pEGFP-14-3-3 η的PC12细胞形态没有发生明显的分化.而用NGF处理PC12细胞后,过表达pEGFP-14-3-3 η的PC12细胞形态仍旧没有发生明显的分化,过表达pGFP的PC12细胞发生了分化.结果说明,14-3-3 η的过表达抑制PC12细胞的分化.我们进一步研究了14-3-3蛋白家族成员ε、γ、τ和η四成员与Math2的相互作用对Math2介导的GAP-43启动子转录激活作用的影响.荧光素酶报告基因检测结果表明,14-3-3ε、γ、τ分别与Math2共转染P19细胞,它们与Math2的相互作用都进一步增强了Math2介导的GAP-43启动子的转录激活作用.而14-3-3 η对Math2介导的GAP-43基因启动子的转录激活作用没有影响.因而我们认为,在RA诱导的神经细胞分化相关的信号通路中,高表达的14-3-3 ε通过与Math2的相互作用,增加Math2的入核运输,上调GAP-43的表达,从而促进神经细胞的分化.
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