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乳腺癌作为全球最常见的女性恶性肿瘤在所有癌症中发病率排名第二,在我国乳腺癌的总体发病率处于全球较低水平,但近年来增长速度不断攀升,尤其是北京、上海两地目前乳腺癌的发病率几乎与乳腺癌高发国家持平。因此对乳腺癌的防治成为了一个重大的公共卫生问题。 癌转移是导致癌症病人预后复发和死亡的最主要原因,90%以上的癌症患者死于癌转移。乳腺癌转移是一个多因素参与、通过多步骤完成的复杂过程,越来越多的研究表明,肿瘤细胞中细胞骨架结构的变化是引起细胞间黏附能力降低和细胞迁移的主要因素,同时也是引发乳腺癌转移的早期细胞事件。 原癌基因lmo2首次是从急性T淋巴细胞白血病患者的染色体断裂点处克隆得到的,该基因位于人11号染色体的短臂1区3带处,能够编码并翻译出隶属于LIM结构域蛋白超家族的转录调控因子LMO2。过往的研究认为原癌蛋白LMO2主要定位于胞核,作为转录调控因子调节其下游靶基因的表达。并且LMO2一直被认为主要在造血发育、血管新生和引起急性T淋巴细胞白血病等生理病理过程中发挥作用,关于其在乳腺癌中的功能迄今尚无任何研究报道。 本论文的前期工作中发现LMO2具有增强乳腺癌细胞迁移的能力,其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中主要定位于胞质,并且通过酵母双杂交鉴定出数个与LMO2相互作用、同时参与细胞微丝骨架调控的重要蛋白,提示LMO2新功能与微丝骨架重构有关。本论文从这一新发现入手,首先通过western blot、细胞免疫荧光技术发现原癌蛋白LMO2在不同转移能力的乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中均主要定位于细胞质中,然后使用MBP-pull down、哺乳动物双杂交以及免疫共沉淀系统揭示出LMO2能够结合cofilin和Arp3,并以它们为靶点调控细胞骨架的重排,最后通过细胞免疫荧光、激光共聚焦显微成像技术观察到LMO2过表达时能促进细胞骨架重构进而影响乳腺癌细胞的运动与转移。 综上所述,本文首次发现了在乳腺癌细胞中原癌基因lmo2的表达产物LMO2蛋白主要定位在细胞质,并且在分子和细胞水平阐明了LMO2通过影响微丝骨架重构进而促进乳腺肿瘤细胞迁移的分子生物学机制,提出了LMO2影响乳腺癌转移的新理论,即LMO2通过抑制cofilin的磷酸化修饰和增加Arp2/3复合体的成核作用共同促进了乳腺癌的转移。