NYD-SP15生物学功能研究及FEN对成年ICR小鼠精子质量及获能率的影响

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:maria76
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景&目的:近年来关于胞苷脱氨酶家族基因的研究报告络绎不绝,许多该家族成员在肿瘤发生、肿瘤耐药、机体免疫和抗病毒感染等生物活动中行使重要作用。NYD-SP15是我们发现的具有胞苷脱氨酶结构域的新基因,对其功能的研究具有开创性的意义。本研究通过对NYD-SP15生物体内胞苷脱氨酶活性、在不同细胞周期中的亚细胞定位、核质穿梭的可能机制及其基因沉默对细胞增殖影响等研究,初步阐明NYD-SP15基因的功能。方法:通过构建NYD-SP15原核表达质粒并诱导NYD-SP15蛋白在大肠杆菌中表达,根据测定的利福平突变频率分析其在体内的胞苷脱氨酶活性;通过构建NYD-SP15的绿色荧光融合蛋白慢病毒载体并感染MCF7细胞,分析其在不同细胞周期时的定位;通过抑制可特异识别NES序列并介导蛋白出核转运的CRM1蛋白,研究NYD-SP15可能的出核机制;通过构建NYD-SP15 RNA干扰慢病毒载体并感染MCF7细胞,并通过流式细胞仪检测细胞周期,研究NYD-SP15基因沉默对细胞周期的影响。结果:NYD-SP15在大肠杆菌中的诱导表达可使ung基因失活菌株BW310产生利福平抗性的频率升高5倍,但其诱导的DNA突变在大肠杆菌rpoB基因中并未显示出热点区域。NYD-SP15在MCF7细胞中的定位呈现3种形式:核中富集、胞浆富集和均匀分布,且3种形式细胞的比例在随细胞周期变化而变化,并在M期胞浆富集细胞比例达到最大值,同时均匀分布的细胞达到最小值。LMB处理后可见NYD-SP15在部分细胞中进一步富集于细胞核。将NYD-SP15在MCF7细胞中RNA干扰后,经流式细胞仪检测后发现干扰组的细胞周期阻滞于S期。结论:NYD-SP15在体内具备胞苷脱氨酶活性;在细胞中的定位具有核-质穿梭所用,且在M期主要定位于细胞质;同时NYD-SP15的这种出核转运可能与CRM1蛋白相关;RNA干扰后发现细胞阻滞于S期也提示我们NYD-SP15可能参与DNA的复制。目的:观察短时间低剂量氰戊菊酯(FEN)暴露对成年雄性ICR小鼠生殖系统及精子质量、活力、获能率的影响。方法:50只成年雄性ICR小鼠,随机分成5组,分别以0、0.009375、0.1875、3.75和45mg/kg剂量的FEN连续灌胃染毒30天后处死,分别测定小鼠体重和双侧睾丸重量;用计算机辅助精子分析(CASA)测定获能前后精子活力;用金霉素(CTC)染色测定获能率;对睾丸切片进行H&E染色观察组织形态学变化。结果:FEN染毒组与对照组相比,0.1875mg/kg组精子获能后运动路径笔直度(STR)与直线性(LIN)都有显著下降(P<0.05);0.009375、0.1875、3.750和45.00 mg/kg剂量组与对照组相比,精子获能率呈极显著的剂量-效应降低(P<0.01)。结论:低剂量FEN暴露30天可使成年小鼠精子质量及精子获能率下降。
其他文献
目的:精子发生进程是涉及到多个环节和多种调节方式的复杂进程,其中减数分裂是生殖细胞特有的方式,同时也是发生多种调控的重要环节,研究减数分裂对了解精子发生异常有重要意义。本研究运用条件型敲除小鼠为模型研究miRNA进程关键酶Dicer1和蛋白磷酸酶PP2A的C亚单位α亚基在减数分裂前期和早期中的作用。方法:利用条件型敲除小鼠Dicer1条件敲除小鼠及PP2ACα条件敲除小鼠与特异性在精原细胞及前细线
明清长篇白话小说在中国古代文学史上占有重要位置,其中世情小说《金瓶梅》突破了以往小说的传统审美意识,关注普通人物的现实生活,实现了中国小说题材和观念的一次改革,具有很高的文学价值。《金瓶梅》在世界范围内的传播必须依靠翻译,本文主要以芮效卫和埃杰顿的两个英语全译本为研究对象,以小说的感官叙事为切入点,以文本细读和文本比较为基本方法并辅以数量统计,充分综合运用叙事学、文化研究和翻译学等学科理论,旨在描
学位
水资源的可得性和有效利用在确保人人都能充分获得水资源方面发挥着重要作用,但这是撒哈拉以南非洲的一个灰色研究领域。为此,本研究旨在调查影响撒哈拉以南非洲境内水资源的可得性和有效利用的因素。在撒哈拉以南非洲,有41个国家被选定来研究水资源可利用性的决定因素,而28个国家则被用来研究水资源利用效率的趋势和改善。通过对城市化、经济增长、农业增长、工业发展和二氧化碳排放对水资源的影响,本研究具有重要的理论意
股权资本成本这一概念在资本市场发展过程中扮演着重要角色,是现代理财学中最为核心的概念之一,被广泛运用于企业投资、筹资、股利决策以及会计估价和绩效评估等领域。《新帕尔格雷夫货币金融大辞典》指出:资本成本是商业资产投资者要求获得的预期收益率。以价值最大化为目标的公司管理者把资本成本作为投资项目的贴现率或最低回报率。换句话说,股权资本成本就其本质而言,其实是一种机会成本。此项问题之所以重要的原因在于其对
学位
我国医疗服务供需矛盾、医疗资源分配不合理问题日益突出。深化医疗卫生体制改革,优化医疗资源合理配置,引导医疗需求有序就医已是当务之急。分级诊疗建设以实施患者下转和优质医疗资源下沉为重要手段,开展医联体建设为有效载体,提升医疗服务均等化和效率、落实健康中国战略为必要路径,是一种重要医改政策方案,备受国家和各级政府大力提倡。目前,分级诊疗运行中引发各级医疗机构间利益冲突明显,欠缺协调患者下转和基层就诊,
当前,经营风险对于企业的多元化发展而言尤为重要,企业如何更好地经营已成为管理层的首要问题。随着布局产业的日益增长,企业一方面要面临组织内部的风险,另一方面要警惕外部的行业风险,经营工作将面临更为尖锐,更为繁琐的矛盾和问题。在多元化发展下,企业迫切需要自查,尽快建立一套完整的风险模型。本论文以M企业为例,通过对其内部经营能力、外部经营能力和经营风险归纳,使用大量数据(M企业的资产、M企业的营业收入、
学位
空间数据的尺度问题是目前许多科学研究中的核心问题之一。从不同的空间尺度研究景观指数的空间数据对景观格局特征的表达,有利于从不同的层次,认识景观格局变化的机理与规律。本文选择赤峰市翁牛特旗作为研究对象,在法国SPOT全色波段遥感影像数据、国家土地二次详查数据和GIS技术的支持下,结合收集的相关资料以及对该地区的实地调查,通过对遥感影像进行一系列数据处理,提取了研究区的景观类型信息,进而通过计算不同层