光动力疗法抑制体外培养翼状胬肉成纤维细胞增殖的实验研究

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目的:1.检测光敏剂血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)在体外培养人翼状胬肉成纤维细胞中的吸收特性;2.观察HMME介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞增殖的作用及其影响因素,为探索光动力疗法治疗翼状胬肉的可行性和有效性提供初步的实验依据.方法:体外培养人初发、复发翼状胬肉成纤维细胞(以下简称为初发、复发细胞),取3-5代用于实验.1.用荧光分析法检测不同HMME孵育浓度和孵育时间与初发、复发细胞吸收HMME量之间的关系;用MTT比色法观察不同浓度HMME及不同作用时间对初发、复发细胞增殖的影响;2.用MTT法测定不同的光敏剂孵育浓度(0、2.5、5.0、10、20、40μg/ml)、孵育时间(0、5、10、20、30、60min)和照光剂量(能量密度:0.62和2.835J/cm<2>)条件下行PDT对体外培养的初发、复发细胞增殖的影响;3.用免疫组化法检测PDT对体外培养初、复发细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响;4.用HE染色观察PDT后细胞形态的交化.结论:PDT对体外培养的初发、复发翼状胬肉成纤维细胞增殖有抑制作用.照光前光敏剂浓度越高、孵育时间越长,照光剂量越大,PDT效应越强.光动力疗法有可能用于翼状胬肉的治疗中.
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