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研究背景：原发性肝细胞癌(human hepatocellular carcinoma，HCC)是最常见的恶性肿瘤之一，全球发病率还在不断上升，我国每年约有三十万人死于此病，年死亡率居世界第一位。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)是由C-erbB l基因编码的具有酪氨酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinase，RTK)活性的跨膜受体，EGFR由胞外配体结合区、跨膜区和胞内区3部分组成，胞内区是其发挥酪氨酸激酶活性、介导信号转导的关键部位。EGRF普遍表达于人体的表皮细胞和基质细胞，临床研究显示，在许多上皮来源的肿瘤细胞，如乳腺癌、非小细胞性肺癌、肾癌、卵巢癌和结肠癌中都存在EGFR的过表达，但是，EGFRaHCC发病进程中的作用尚不十分明确，还有待进一步证实。近年有研究报道，EGFR信号转导通路在正常组织中多呈关闭状态，而在肿瘤组织中被激活开放，其下游信号转导通路主要包括Ras-ERK／MAPK，PI3K／AKT和JAK／STAT。其中Ras-ERK／MAPK途径与增殖的关系较为密切。本实验采用免疫组织化学En Vision二步法观察EGFRa肝癌组织中的表达情况；应用EGFR激动剂和抑制剂处理人肝细胞癌细胞HuH7，观察EGFR活性改变对细胞增殖的影响，初步探讨HCC中的EGFR信号转导通路及其影响肿瘤细胞增殖的机制。研究目的：研究HCC中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)的表达及HuH7细胞内EGFR信号转导通路，探讨EGFR在促进肿瘤细胞增殖中的作用。研究方法：1．用常规方法培养人肝细胞癌细胞HuH7；2．用免疫组织化学实验检测HCC组织中EGFR的表达；3．用外源性EGF和AG1478处理人肝细胞癌细胞HuH7；4．用western Blot实验检测人肝细胞癌细胞HuH7中EGFR、p-EGFR、p-ERK蛋白表达；5．用WST实验检测细胞增长率。研究结果：1．在17例HCC患者癌组织中，EGFR的阳性表达率为100％(17／17)；人肝细胞癌细胞HuH7中EGFR的表达明显高于正常肝细胞HL-7702。2．外源性EGF(10μg／L)处理后，ERK和EGFR的磷酸化水平明显提高，同时细胞生长率提高9.2％，而EGFR特异性抑制剂AG1478(20μmol／L)能明显阻断EGF诱导的ERK、EGFR蛋白的磷酸化激活和促细胞增殖作用。研究结论：HCC中，EGFR高表达，EGFR的激活主要通过受体磷酸化完成，活化的p-EGFR可能通过ERK／MAPK下游信号通路传递信息，调控HCC的发生发展。