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目的:考察本实验室常用两种来源何首乌饮片水提物的主要成分含量。考察不同给药周期、不同剂量何首乌水提物对正常大鼠或肝细胞色素P450酶活性抑制的大鼠肝功能的影响。方法:1.高效液相色谱法分析实验用何首乌水提物主要成分及含量。2.考察何首乌水提物连续灌胃对大鼠肝脏功能的影响:大鼠随机分成6组,每组8只,分别为空白对照组、何首乌对照组、CYP1A2抑制剂对照组、CYP2E1抑制剂对照组、CYP1A2抑制剂+何首乌组、CYP2E1抑制剂+何首乌组,其中CYP1A2抑制剂对照组、CYP1A2抑制剂+何首乌组大鼠在灌胃开始前5 d每天腹腔注射CYP1A2抑制剂西咪替丁注射液50 mg·kg-1 BW,CYP2E1抑制剂对照组、CYP2E1抑制剂+何首乌组于每天灌胃前2.5 h腹腔注射反式-1,2-二氯乙烯100 mg·kg-1 BW,以10 g生药·kg-1 BW何首乌水提物连续28 d灌胃各实验组大鼠,分别于灌胃何首乌水提物的第1d,8 d,15 d,22 d,28 d后24 h取血测定血液生化指标ALT（丙氨酸氨基转移酶）、AST（天门冬氨酸氨基转移酶）、ALP（碱性磷酸酶）。3.考察何首乌水提物连续加间隔灌胃对大鼠肝脏功能的影响:以10 g生药·kg-1 BW何首乌水提物连续14d、间隔14d、再灌胃1 d、间隔7d、再灌胃1d给正常大鼠和CYP1A2酶活性抑制的大鼠,分别于第1d,7d,29 d,37 d灌胃后2h和第2d,14 d,37 d灌胃后24 h取血测定血液生化指标ALT、AST、ALP、TBIL（总胆红素）、DBIL（直接胆红素）、TP（总蛋白）、Alb（白蛋白）、TCHO（总胆固醇）等血液生化指标并取大鼠肝脏进行组织切片和病理学分析。4.考察何首乌水提物不同给药剂量对CYP1A2酶活性抑制大鼠血液生化指标的影响:大鼠随机分成6组,每组8只,分别为空白对照组,何首乌低剂量组,何首乌高剂量组,CYP1A2抑制组,CYP1A2抑制+低剂量组,CYP1A2抑制+高剂量组。分别以10 g·kg-1 BW、30 g生药·kg-1 BW何首乌水提物连续7 d灌胃各组实验组大鼠,分别于第1d、7d灌胃后2h和第2d灌胃后24 h取血测定血液生化指标。5.考察何首乌水提物不同给药剂量对CYP2E1酶活性抑制的大鼠肝功能的影响:大鼠随机分成6组,每组10只,分别为空白对照组,何首乌低剂量组,何首乌高剂量组,CYP2E1抑制组,CYP2E1抑制+低剂量组,CYP2E1抑制+高剂量组。CYP2E1抑制组、CYP2E1抑制+低剂量组、CYP2E1抑制+高剂量组大鼠在灌胃开始前2.5 h腹腔注射CYP2E1抑制剂反式-1,2-二氯乙烯100 mg·kg-1 BW,分别以10 g生药·kg-1 BW、30 g生药·kg-1 BW何首乌水提物连续14 d灌胃各组实验组大鼠,分别于第1d、7d、14d灌胃后2h和24h取血测定血液生化指标,并于第7d和14d灌胃后24 h取大鼠肝脏进行组织切片和病理学分析。。结果:1.高效液相分析结果显示,湖北产何首乌水提物中主要化学成分有2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（简称:二苯乙烯苷）、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚,含量分别为（145.41±4.28）μg·mL-1、（13.56±0.20）μg·mL-1、（1.37±0.12）μg·mL-1、（0.45±0.02）μg·mL-1;四川产何首乌主要化学成分与湖北产何首乌相同,含量分别为（49.04+4.73）μg·mL-1、（6.84+0.16）μg·mL-1、（0.91+0.09）μg·mL-1、（0.31±0.01）μg·mL-1。2.10 g生药·kg-1 BW何首乌水提物连续28 d灌胃正常大鼠,实验组体重明显下降,摄食率无明显变化,对大鼠的血液生化指标ALT、AST和ALP无明显影响,但观察发现大鼠出现怠动、毛色不华、便软或稀便等现象;连续28 d灌胃CYP1A2、CYP2E1酶活性抑制的大鼠,其ALT、AST、ALP均无明显升高。3.连续加间隔灌胃10 g生药·kg-1 BW何首乌水提物,连续给药14 d期间,正常大鼠8项血液生化指标中仅TBIL和DBIL在第7 d 2 h有一过性升高（P<0.05）,第7 d灌胃后2 h检测到CYP1A2酶活性抑制组大鼠比各对照组的TBIL和IBIL显著升高;连续14 d灌胃给予何首乌水提物,间隔14 d后给药1 d 2 h以及间隔7 d给药1 d 2 h,何首乌组大鼠ALT均显著升高,但间隔7 d给药1d 24 h测定ALT指标没有明显升高,肝脏病理切片分析也未发现大鼠肝脏有明显损伤情况。4.以10 g生药·kg-1 BW、30g生药·kg-1 BW何首乌水提物连续7 d灌胃正常大鼠、CYP1A2酶活性抑制的大鼠,结果显示,灌胃高剂量的大鼠的ALT在第1d2h、第2d 24h、第7d2h较空白对照组均显著升高,第1 d2h和第7d2h时TBIL、IBIL较空白组和低剂量组均有明显升高;CYP1A2酶活性抑制组大鼠灌胃30 g生药·kg-1 BW何首乌水提物后,在给药第1 d 2 h可检测到AST和TBIL升高,但第2 d 24 h检测,CYP1A2酶活性抑制组与同样剂量何首乌水提物组大鼠相比,各项指标均无显著性差异。5.以10 g生药·kg-1 BW、30 g生药·kg-1 BW何首乌水提物连续14 d灌胃正常大鼠、CYP2E1酶活性抑制的大鼠,结果显示,连续14 d灌胃期间,低高剂量何首乌水提物对正常大鼠血清TBIL、DBIL和IBIL水平均有显著升高作用,肝脏病理切片观察发现,何首乌高剂量组有肝细胞空泡化和成纤维细胞肥大、增生现象;30 g生药·kg-1 BW何首乌水提物可使CYP2E1酶活性被抑制的大鼠血清TBIL、IBIL在灌胃7d及14d后2 h检测有明显升高。结论:1.本课题组常用两种来源何首乌饮片水提物主要成分含量及比例有较大不同,湖北产何首乌饮片主要成分含量比四川产饮片高。2.大鼠连续灌胃10 g生药·kg-1 BW何首乌水提物并未引起大鼠血液中ALT、AST及ALP明显升高,但30 g生药·kg-1 BW何首乌水提物灌胃7d、10 g生药·kg-1 BW何首乌水提物灌胃14d即可引起大鼠肝功能异常主要表现为胆红素升高,提示临床上何首乌高剂量短期用药及低剂量长期用药均有引发肝毒性的潜在风险。3.10 g生药·kg-1 BW何首乌水提物对CYP1A2或CYP2E1酶活性抑制的大鼠的血液中转氨酶水平无明显影响,但可引起CYP1A2酶活性抑制的大鼠血液中总胆红素和间接胆红素明显升高,30 g生药·kg-1 BW何首乌水提物能使CYP1A2、CYP2E1酶活性抑制大鼠的总胆红素和间接胆红素明显升高,因此,CYP1A2、CYP2E1水平低下可能会加剧何首乌所致肝毒性。