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研究背景:长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)是一种长度超过200个核苷酸且不编码蛋白质的RNA。近些年来,研究表明长链非编码RNA可以通过染色质的修饰、表观遗传学、基因组印记及调节蛋白质活性等不同机制来调控基因表达。研究发现许多长链非编码RNA如HOTAIR、MALAT1、CRNDE和GAS5等在胰腺癌组织和细胞中均有异常表达,并且与胰腺癌的发生发展过程密切相关,可能成为胰腺癌早期诊断的标志物和生物治疗的靶点。研究目的:旨在筛选胰腺癌组织与癌旁正常胰腺组织中差异性表达的长链非编码RNA;并通过体外细胞实验,研究调控其表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响,初步阐明该长链非编码RNA在胰腺癌发生发展中所发挥的作用。研究方法:(1)利用lnc RNA表达芯片检测3组胰腺癌组织与癌旁正常胰腺组织中的长链非编码RNA的差异性表达情况,筛选出本研究目的长链非编码RNA LOC101928505;并且采用q RT-PCR检测长链非编码RNA LOC101928505在20对胰腺癌组织及癌旁正常胰腺组织中的表达情况。(2)构建长链非编码RNA LOC101928505的sh RNA敲出质粒和pc DNA3.1过表达质粒,运用CCK8、流式细胞及Transwell实验探讨调控长链非编码RNA LOC101928505的表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭力等恶性生物学行为的影响。研究结果:(1)利用lnc RNA表达芯片检测3组胰腺癌组织与癌旁正常组织中的长链非编码RNA的差异性表达情况,筛选出异常高表达的长链非编码RNA LOC101928505;并且经过q RT-PCR对20对胰腺癌患者的胰腺癌组织和癌旁正常胰腺组织中进行验证,结果证实长链非编码RNA LOC101928505在胰腺癌中的表达水平显著高于癌旁胰腺组织(P<0.05)。(2)成功构建长链非编码RNA LOC101928505的sh RNA敲出质粒和pc DNA3.1过表达质粒,并且筛选出稳定表达上述质粒的胰腺癌细胞。通过sh RNA下调Bx PC-3和Panc-1细胞中LOC101928505的表达水平,采用CCK-8检测发现下调LOC101928505表达后胰腺癌细胞增殖能力减弱(P<0.05);运用流式细胞检测发现下调LOC101928505表达后胰腺癌细胞的早期凋亡细胞比较对照组明显升高(P<0.05);Transwell实验结果显示下调LOC101928505表达后胰腺癌细胞侵袭能力减弱(P<0.05)。另外,上调Bx PC-3和Panc-1细胞中LOC101928505的表达水平后,通过CCK-8、流式细胞检测及Transwell实验,研究发现上调胰腺癌细胞的LOC101928505的表达显著促进胰腺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡以及增强癌细胞体外侵袭能力。研究结论:研究发现长链非编码RNA LOC101928505在胰腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常胰腺组织,其异常高表达可能促进胰腺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡以及增强癌细胞体外侵袭能力,初步证实长链非编码RNA LOC101928505在胰腺癌发生发展中扮演着促癌基因的角色。