背景与目的急性肺损伤（ALI）/急性呼吸窘迫（ARDS）是世界范围内严重危害公共健康的疾病,但其病理机制尚不清楚。其主要临床表现为急性缺氧性呼吸衰竭、通气/血流比失衡和严重低氧血症。ALI/ARDS的病理特征包括弥漫性间质水肿和肺泡水肿、肺容积减少和肺顺应性受损,所有这些主要由严重的肺部炎症以及对气道和肺泡上皮的损害引起。包括绿脓杆菌在内的细菌感染是ALI/ARDS的主要发病机制之一。近年来,虽然有大量的研究,但是仅集中在ALI/ARDS的病理生理学分析上,并且由于绿脓杆菌的耐药性,基于特定分子靶点的治疗方法的开发仍然缺乏。因此,本研究旨在于探讨绿脓杆菌诱导急性肺损伤的分子机制,并为临床治疗提供新的干预靶点。方法1.使用生理盐水,气道正常菌群（A.N.F）以及绿脓杆菌（P.ae）,通过气道给药的方式给小鼠造膜,取各组小鼠的肺泡灌洗液（BALF）和肺组织进行相关病理指标检测;2.通过流式细胞术检测各组小鼠肺组织单细胞悬液的中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的表达水平;3.通过免疫印迹检测小鼠肺组织中坏死和炎症小体信号通路的蛋白水平的表达情况;免疫荧光检测小鼠肺组织切片中坏死信号通路关键分子p-MLKL以及炎症小体信号通路关键分子ASC的表达情况;4.酶联免疫吸附试验检测临床标本和小鼠BALF的TNF-α、IL-6、IL-17A的表达情况;5.体外培养人肺腺癌细胞系A549,使用生理盐水、气道正常菌群（A.N.F）以及绿脓杆菌（P.ae）刺激细胞,在检测上述蛋白分子的同时,检测线粒体膜电位以及活性氧的表达水平。结果1.小鼠模型显示,与生理盐水和气道正常菌群组相比,绿脓杆菌组的小鼠肛温急剧下降;肺组织切片H＆E染色结果显示,绿脓杆菌可以导致肺泡塌陷、气道上皮细胞脱落以及炎性细胞的浸润;BALF的LDH检测也表明,模型组的小鼠肺组织发生了一定程度的损伤。我们发现,绿脓杆菌介导的上皮坏死可以导致后续的免疫反应,在肺的病理过程中起着重要作用;2.肺组织单细胞悬液的流式结果表明,绿脓杆菌可以导致肺组织中性粒细胞的急剧升高,然而嗜酸性粒细胞的数量没有明显变化,因此可以得出,绿脓杆菌可以导致中性粒细胞的升高;3.免疫印迹结果表明,绿脓杆菌可以导致肺组织中p-MLKL和Caspase-1的剪切,免疫荧光试验验证了这一现象,药理干预和基因组敲除能够减轻绿脓杆菌诱导的急性肺损伤和肺部炎症,表明绿脓杆菌诱导的急性肺损伤可以导致坏死和炎症小体信号通路的激活,这两条信号通路在该模型中起着重要作用;4.酶联免疫吸附试验（ELISA）结果表明,细菌性肺炎患者的血清以及绿脓杆菌处理的小鼠BALF中TNF-α、IL-6、IL-17A的表达水平显著升高;5.体外试验结果表明,绿脓杆菌可以激活上皮细胞MLKL介导的坏死信号通路,并导致了后续的免疫反应,导致上皮细胞线粒体膜电位的破坏并释放活性氧（ROS）,促进Caspase-1活化并导致细胞焦亡的发生;小分子抑制剂MitoTEMPO可以有效改善绿脓杆菌诱导的急性肺损伤。结论1.程序性坏死和炎症小体信号通路共同参与了绿脓杆菌诱导的急性肺损伤;2.绿脓杆菌诱导的急性肺损伤促进中性粒细胞的募集和IL-17A的分泌;3.MLKL转位到线粒体导致线粒体膜电位的改变,从而促进ROS的释放;4.程序性坏死介导的ROS释放调节了NLRP3炎症小体的形成;5.活性氧清除剂Mito-TEMPO可以抑制炎症小体的组装,可以作为临床上潜在的治疗药物。