【摘 要】
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橡胶籽富含蛋白质、脂肪、不饱和脂肪酸,但其含有的生氰糖苷类物质(主要为亚麻苦苷)限制了橡胶籽进一步的开发利用;此外,亚麻苦苷具有潜在的医疗价值,目前对亚麻苦苷直接检测的研究较薄弱。本课题采用高效液相色谱结合蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD),建立了一种对亚麻苦苷进行直接定性定量的方法,并对橡胶籽中亚麻苦苷的提取条件进行了优化,主要结果如下:(1)确立HPLC-ELSD法的检测条件组合:流动相为
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橡胶籽富含蛋白质、脂肪、不饱和脂肪酸,但其含有的生氰糖苷类物质(主要为亚麻苦苷)限制了橡胶籽进一步的开发利用;此外,亚麻苦苷具有潜在的医疗价值,目前对亚麻苦苷直接检测的研究较薄弱。本课题采用高效液相色谱结合蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD),建立了一种对亚麻苦苷进行直接定性定量的方法,并对橡胶籽中亚麻苦苷的提取条件进行了优化,主要结果如下:(1)确立HPLC-ELSD法的检测条件组合:流动相为乙腈/水(85/15)、漂移管温度为75℃、载气(氮气)流速为1.5 L/min。通过精密度试验、重复性试验、稳定性试验、回收率试验考察该检测方法的可行性,计算得到的RSD值分别为1.87%、3.55%、1.85%、1.73%,回收率为 95.54±0.95%。(2)确定抑制橡胶籽β-葡萄糖苷酶活性的方法,优选微波加热4 min(功率400 W)、水蒸汽蒸样5 min+80℃烘烤10 min、1%葡萄糖酸内酯浸泡5 min,以上三种处理下,测得的亚麻苦苷含量分别为1.15±0.03 mg/g、0.85±0.02 mg/g、0.47± 0.02 mg/g;未经灭酶处理,直接提取橡胶籽中的亚麻苦苷,测得的含量是0.45±0.02 mg/g,最终采用微波加热4 min(功率400 W)作为样品的处理方法。(3)对橡胶籽脱脂工艺进行优化,通过单因素试验和响应面试验,确定最佳工艺组合:溶剂种类为异丙醇、料液比(g:mL)为1:3、静置时间为80 min、静置温度为36.8℃、超声时间为40 min、超声功率为24 W、超声温度为40℃,在最佳条件下进行试验,测得亚麻苦苷含量为2.59±0.04 mg/g。(4)对橡胶籽亚麻苦苷提取工艺进行优化,通过单因素试验和响应面试验,确定最佳工艺组合:提取溶剂为甲醇、甲醇浓度为51%、料液比(g:mL)为1:5、超声时间为50 min、超声功率为120 W,超声温度为70℃,在最佳条件下进行试验,测得亚麻苦苷含量为5.61±0.12 mg/g。
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