罗望子有效成分的提取纯化及抗氧化作用研究

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本论文以罗望子为研究对象,对罗望子中果肉多糖、壳黄酮和种子果胶等有效成分进行了提取、分离及纯化工艺研究,对提取物中多糖、黄酮和果胶的含量进行了测定,对各提取物进行了抗氧化活性研究。得到的结果主要有:1.对罗望子多糖提取工艺进行了优化。通过单因素及正交实验考察了热水浸提和微波辅助两种方法对罗望子果肉多糖的提取效果的影响。得到热水浸提法最佳工艺条件为:料液比1:20(g/mL),提取温度90℃,提取时间90min, pH6.0,在此工艺条件下多糖得率达17.18%。得到微波辅助法最佳工艺条件为:微波功率400W,微波时间10min,料液比1:30,在此工艺条件下多糖得率达13.52%。2.经热水浸提法提取所得多糖粗提物用Sevag法脱蛋白、活性炭脱色、乙醇醇沉进行了纯化处理,并对纯化后的多糖进行了理化检测及离子色谱分析。纯化后的多糖含量达到了63.65%,蛋白质含量仅为0.0022g/L;多糖水溶液pH为3.77,说明该多糖是酸性多糖。结合红外光谱和离子色谱分析得知:罗望子果肉多糖主要含有葡萄糖、果糖和半乳糖醛酸。3.对罗望子壳黄酮提取工艺进行了优化。通过单因素及正交实验考察了超声波辅助和微波辅助两种方法对罗望子壳黄酮的提取效果的影响。得到超声波辅助提取法最佳工艺条件为:乙醇浓度为60%,液料比为1:25,提取时间40min,提取温度50℃,在此工艺条件下黄酮得率达39.81%。得到微波辅助提取法最佳工艺条件为:料液比为1:15,微波时间14min,乙醇浓度50%,微波功率为500W,在此工艺条件下黄酮得率达38.36%。4.对罗望子壳黄酮利用柱层析分离纯化工艺进行了优化。考察了静态吸附解析和动态洗脱条件对罗望子壳黄酮分离纯化效果的影响。6种树脂静态吸附和解析的实验结果表明:聚酰胺树脂的吸附和解析效果较为理想,其静态吸附和解析最佳工艺条件为:吸附液温度为20℃,吸附平衡时间为2h,解析液温度为30℃,解析平衡时间为4h,洗脱液乙醇浓度为80%;柱层析分离纯化工艺条件为:上样树脂质量为30g,上样水洗体积为2BV(100mL),洗脱液用量为3BV(150mL)。在此条件下,罗望子壳黄酮提取物样品中总黄酮含量从12.93%提高到31.00%。5.对罗望子种子果胶提取工艺进行了优化。通过正交实验考察了有机酸水溶液法对罗望子果胶的提取效果的影响。得到最佳工艺条件为:料液比1:35,pH为4.6,煮沸时间20min,沉降时间4h,在此条件下,果胶得率达26.51%。通过该工艺提取的罗望子果胶产品指标均优于国家果胶产品标准。6.对所提取的罗望子果肉多糖、壳黄酮和种子果胶进行了清除DPPH·及总抗氧化能力的研究。结果显示:三种提取物随着浓度的增大,清除DPPH和总抗氧化能力随之增强。但总的效果低于Vc和BHT。
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