[背景]慢性皮肤溃疡是一种临床常见疾病,病程长、易反复发作,可以导致患者截肢,甚至死亡。目前,慢性皮肤溃疡创面修复已成为临床治疗的难题之一,西医治疗本病效果并不十分理想。几千年来,中医传统外治法在慢性皮肤溃疡治疗中发挥着不可替代的作用,具有独特优势。“祛腐生肌”是中医外科治疗溃疡的核心理论之一。判断创面“脓腐’及“生肌”的不同状态,是把握疾病发展阶段以及正确应用“祛腐生肌”理论治疗慢性皮肤溃疡的前提,决定着疾病的疗效及预后。然而,溃疡局部症状的观察与描述,主要依赖医生的实践经验及主观判断,主观的差异造成了这种描述性的评价标准难以客观化,从而影响临床诊疗的规范化,这是中医诊疗普遍存在的问题之一。究其根本,缺乏客观的评价指标是主要问题。[目的]光学相干层析技术(OCT)是近年来迅猛发展的一项生物医学成像技术,具有非接触、无创伤、高灵敏、可重复等优点。本研究的主要目的是：将光学相干层析技术应用于中医慢性皮肤溃疡的评价,提取“脓腐”及“生肌”的光学表征及光学参数,动态观测慢性皮肤溃疡创面“祛腐”、“生肌”的变化特点,为解决目前慢性皮肤溃疡主观描述评价的缺陷提供依据,是将光学检测与中医外科学结合的新尝试。[方法]首先,应用光学相干层析技术检测大鼠正常皮肤结构、大鼠皮肤缺损模型不同时间(造模1h内、3d、6d、9d、15d)创面的OCT影像,动态监测创面OCT变化,结合组织病理学形态,初步提取“脓腐”及“生肌”光学表征及光学参数。其次,采用皮肤缺损、埋置异物及金黄色葡萄球菌感染三种因素叠加的方法建立慢性皮肤溃疡实验动物模型,应用典型祛腐生肌中药朱红膏干预创面,将“脓腐”、“生肌”光学表征及光学参数作为客观指标,研究“祛腐生肌”治疗慢性皮肤溃疡的创面变化特点,通过创面组织HE染色对其进行验证。再次,在此基础上,尝试将OCT技术应用于慢性皮肤溃疡的临床监测,结合中医局部症状量化评分,探讨“祛腐生肌”治疗慢性皮肤溃疡的光学变化特征,验证OCT“光学脓腐”、“光学生肌”在临床应用的可行性。最后,根据慢性皮肤溃疡中药干预后创面OCT特征,检测不同时间(3d、6d、9d、15d)创面炎症分级、相关炎症因子(MCP-1、 TNF-a, IL-10)和生长因子(PDGF-AB、TGF-β1、VEGF、EGF)水平,从分子角度对OCT监测创面“脓腐”、“生肌”变化评价进行探讨及验证。[结果](一)该OCT系统能够较清晰地显示正常大鼠皮肤组织结构。OCT影像能够清晰反映创伤1h内创面组织微观形态变化,直观地体现创面水肿发生部位及不同时间水肿的变化情况。通过检测皮肤缺损创面不同时间的OCT影像,记录了创面愈合过程中结痂、脓腐脱落、肉芽组织的光学特征。“脓腐”、“生肌”具有不同的OCT表征及光学参数：“脓腐”没有正常组织的结构,存在的状态不同,OCT表现内部结构各异,随着脓腐密度的降低,相对衰减系数水平降低,但均高于正常组织衰减系数水平；肉芽组织衰减系数低于正常组织水平,OCT图像可见肉芽组织内部结构均匀、细腻,稚嫩的新生肉芽组织增多并逐渐向成熟转化,衰减系数随之升高并接近正常组织水平,体现了创面“生肌”的过程。(二)朱红膏用药9d、15d,治疗组创面面积明显小于溃疡模型组。OCT检测结果显示：该溃疡模型创面OCT表现丰富,可见脓腐、结痂较多、脓液稠厚,持续时间较长,9d创面仍有大量脓腐存在；与溃疡模型组比较,朱红膏用药促使创面产生大量的脓液,给药3d,OCT表现结痂、脓腐较重,创面衰减系数明显升高,通过继续治疗,创面脓腐脱落速度加快,给药6d、9d衰减系数均显著低于模型创面同期水平；用药15d,治疗组创面肉芽组织衰减系数显著高于模型组,OCT图像光强密度及细腻程度优于溃疡模型组。HE结果显示模型组创面干痂存在时间较长,多数超过9d；治疗组创面坏死组织量比同期模型组明显减少,创面肉芽组织从6d开始生长,成纤维细胞增殖较快,9d、15d组织形态及肉芽组织生长速度均优于溃疡模型组。(三)临床慢性皮肤溃疡监测中,创面局部症状变化与客观化的“脓腐”、“生肌”光学特征相符合。创面评分显示朱红膏治疗慢性皮肤溃疡,对创面局部分泌物、脓腐及肉芽的状态均有所改善。用药后,创面分泌物出现“先增多-后减少”的现象,用药3d时明显增多,9d显著减少,分泌物由黄浊稠厚转为黄白粘稠,气味未见明显改变；6d、9d,创面脱腐程度改善,深度未见明显改变；创面肉芽增多、颗粒水肿有所改善。临床创面结痂、脓腐、肉芽OCT表现特征与前期实验性溃疡特征相一致。OCT记录了创面“祛腐”为主的祛腐生肌的动态变化：创面坏死组织及分泌物形成结痂,用药后结痂致密程度逐渐降低,与下层组织连接紧密,无明显分界,难以剥离；继续用药,创面结痂与下层组织之间出现明显的分层,结痂较易去除,露出脓腐相间的坏死组织；创面分泌物增多,随着坏死组织的清除,分泌减少转清,创面新生肉芽组织。朱红膏治疗前创面组织相对衰减系数较高,处于脓腐水平,用药3d、6d、9d衰减系数逐渐下降。(四)分析“祛腐生肌”光学特征创面炎症及相关因子水平：治疗组与模型组创面炎症反应级别及炎症细胞百分比未见明显差异；药物干预早期炎症因子水平升高,增强祛腐能力；后期水平降低,抑制炎症过度反应,使创面顺利进入增殖期；药物干预影响多种细胞因子水平,促进创面生肌长肉,PDGF-AB水平9d升高,15d降低；TGF-β1水平9d降低；VEGF水平3d、6d、9d升高,15d降低；EGF水平3d、6d、15d升高。[结论]根据以上研究得出结论：OCT技术影像清晰,可应用于皮肤创面的动态监测。赋予了光学特征及参数的“脓腐”及“生肌”,可以作为客观指标,用来评价慢性皮肤溃疡创面状态,动态描绘创面“祛腐生肌”变化过程。OCT技术可以应用于“祛腐生肌”治疗慢性皮肤溃疡的临床监测,对创面进行客观评价。