恶性黑色素瘤是一种预后极差的皮肤肿瘤,近十年来,在我国发病率上升了约110.3%。黑色素瘤多由MAPK信号通路的异常激活驱动进展,其主要突变类型是BRAF蛋白激酶的V600E突变。目前对BRAFV600E突变黑色素瘤所采取的重要治疗方法是联合靶向BRAF和MEK,该治疗方式虽然延长了患者的生存期,然而治疗之后随之出现的耐药性成为黑色素瘤患者预后差的关键原因。因此研究黑色素瘤的耐药机制并且探究耐药后可改善治疗效果的新治疗靶点是当前亟待解决的问题。当前一些耐药相关的遗传学机制已被阐明,但仅仅在此角度难以全面解释耐药的发生。因此,基于组蛋白修饰的表观遗传调节因子为解决治疗后耐药性的问题提供了新的思路。本研究构建了对达拉非尼耐药的BRAFV600E突变黑色素瘤的耐药单克隆。经探究发现,黑色素瘤细胞耐药后迁移能力显著增强,PI3K/AKT信号通路发生激活。且经过代谢组学检测,黑色素瘤的耐药与氨基酸代谢的重塑密切相关,主要体现为黑色素瘤细胞耐药后细胞内谷胱甘肽、谷氨酰胺、中性氨基酸和支链氨基酸的含量显著上升。此外黑色素瘤耐药后细胞内活性氧水平下降,DNA损伤修复可不受达拉非尼的抑制。为探究可改善耐药黑色素瘤治疗效果的表观遗传学靶点,研究通过表观遗传化合物库进行药物筛选,发现达拉非尼与各表观遗传药物之间广泛存在拮抗作用,不适合联合用药。而与对照BRAFV600E突变黑色素瘤细胞对比,耐药黑色素瘤对靶向BET家族重要成员BRD4的抑制剂更敏感,提示BRD4参与了黑色素瘤的耐药过程。通过进一步实验,发现BRD4抑制剂可显著抑制耐药黑色素瘤细胞的迁移。此外,BRD4也参与了耐药细胞的DNA损伤修复和氨基酸代谢重塑。本研究的结果表明BRAFV600E黑色素瘤的耐药涉及多种机制。BRD4参与了BRAFV600E突变黑色素瘤的耐药过程,当使用BRD4抑制剂时,耐药黑色素瘤细胞的增殖和迁移显著受抑。BRD4可作为耐药BRAFV600E突变黑色素瘤的新的治疗靶点,改善对耐药黑色素瘤的治疗效果。