目的:1.研究两色金鸡菊水提物优化工艺并对其中的主要化学成分进行分析。2.改进两色金鸡菊总黄酮含量测定的方法。3.研究大孔树脂纯化两色金鸡菊总黄酮的工艺条件。4.建立薄层生物自显影方法体外筛选具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的活性物质。5.对两色金鸡菊不同提取物进行急性毒性研究,为安全性评价提供依据。6.研究两色金鸡菊醇提后乙酸乙酯萃余液对高血脂症小鼠调血脂的作用。方法:1.对两色金鸡菊的水提物进行不同干燥方式研究,在实验室设备条件下进一步开展放大工艺研究,采用UV法对不同工艺水提物总黄酮进行含量测定,参照葡萄牙文献采用TLC法和HPLC法对放大工艺的提取物中主要成分进行定性和初步定量研究。2.采用以柚皮苷为对照品进行方法学考察,并用此方法测定两色金鸡菊不同提取物中的总黄酮含量。3.以总黄酮含量为指标,采用静态吸附法,以吸附率和比吸附量筛选最佳树脂,以回收率为指标,对上样液浓度、洗脱流速、洗脱剂浓度和洗脱曲线工艺参数进行考察,测定纯化前后的总黄酮含量,用TLC法对纯化前后的主要物质进行分析,采用HPLC法对主要化合物的纯化效果进行比较。4.将两色金鸡菊水提物、醇提物和乙酸乙酯提取物在硅胶板上以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（9︰7︰3）为展开剂展开,晾干,在硅胶板上先喷α-葡萄糖苷酶溶液孵育60min,再以2-萘基-α-D-葡萄糖苷溶液和固蓝B盐溶液（1︰1）为显色剂,显色后在白光下对比获得具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的物质,并对两色金鸡菊中具有体外α-葡萄糖苷酶抑制作用的成分进行指认。5.急性毒性研究采用最大给药量试验的方法,使用最大耐受量计算两色金鸡菊不同提取物的急性毒性,将小鼠的最大耐受量以临床人用剂量5g（干花）/60kg（体重）进行折算,评价其安全性。6.采用高脂饲料喂养8周建立高血脂症小鼠模型,随机分为模型组、辛伐他汀组、萃余液高剂量组、萃余液中剂量组和萃余液低剂量组,以正常小鼠作为正常对照组,在急毒实验的基础上选择两色金鸡菊醇提后乙酸乙酯萃余液观察其对高血脂症模型组小鼠血脂四项TC、TG、HDL-C、LDL-C的影响,测量各组小鼠AST和ALT的含量,考察两色金鸡菊萃余液对高血脂症模型小鼠肝功能的影响。结果:1.其中绿原酸含量在真空干燥工艺中最高;黄酮马里苷含量在真空干燥工艺中含量最高;黄酮奥卡宁在浸渍法未浓缩工艺中含量最高;马里苷含量在真空干燥工艺中最高;二咖啡酰奎宁酸在真空干燥工艺中最高;奥卡宁在浸渍法未浓缩工艺含量最高;2.通过方法学考察,在以柚皮苷为对照品溶液测定两色金鸡菊中总黄酮含量时,检测波长为420nm,该方法有较好的精密度、准确度、回收率在99%¹03%之间。3.采用HPD-100大孔树脂分离纯化两色金鸡菊提取物的总黄酮含量,确定最佳工艺是上样浓度为20mg·ml^-1,洗脱流速为3BV·h^-1,洗脱剂浓度为75%,洗脱剂用量为4BV。4.薄层板上斑点周围可以观察到白色或类白色抑制区,说明两色金鸡菊水提物、醇提物和乙酸乙酯3种提取物中均有α-葡萄糖苷酶抑制成分。5.使用最大耐受量评价其安全性,两色金鸡菊水提物浸渍法直接冷冻干燥提取物相当于人用剂量的2497倍;两色金鸡菊水提物浸渍法浓缩后冷冻干燥提取物相当于人用剂量的2571倍;两色金鸡菊水提物真空干燥工艺提取物相当于人用剂量的914倍;两色金鸡菊水提物喷雾干燥提取物相当于人用剂量的4115倍;两色金鸡菊乙酸乙酯提取物相当于人用剂量的4582倍;两色金鸡菊醇提后乙酸乙酯萃余提取物相当于人用剂量的1920倍。6.两色金鸡菊萃余液低、中、高剂量组可降低小鼠血清中TC的含量（P<0.05）、显著降低TG的含量（P<0.01）,萃余液可以显著降低实验性高血脂症小鼠血清中AST和ALT的含量（P<0.01）。结论:1.实验室工艺不同提取物的总黄酮含量在17%²1%之间,进一步放大工艺后,总黄酮含量在20%³4%之间。参照葡萄牙文献的方法,对两色金鸡菊水提物不同工艺提取物主要化合物进行分析可知各工艺的主要化合物的含量有差异。2.以柚皮苷为对照品的方法可以弥补以芦丁为对照品测定两色金鸡菊乙酸乙酯提取物时出现溢出导致无法测出总黄酮含量的问题,经过方法学考查,该方法有较好的精密度和准确度,回收率在99%¹03%之间。3.大孔树脂纯化可以将两色金鸡菊醇提物的总黄酮含量由10%提高至30%,该工艺稳定可行。4.建立的薄层生物自显影技术可以快速筛选具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的化合物,经指认两色金鸡菊中马里苷和奥卡宁具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制成分。5.最大耐受量与人用倍数折算均大于100倍,由此可以说明两色金鸡菊不同工艺的提取物临床用药安全。6.两色金鸡菊萃余液可以改善高血脂症小鼠的血脂水平及肝功能。