大鼠成釉器发育的动态组织学研究

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目的:本实验旨在通过对大鼠成釉器正常发育状态下形态及组织学结构进行观察,明确发育各个阶段对应的胚胎时期,探讨大鼠成釉器发育的组织学时序特点,以及形态结构观察结果与成釉器发育各阶段组织学变化的关系。方法:分别取怀孕13、14、16、18、20天的SD大鼠及新生2、3天的乳鼠,过量水合氯醛腹腔注射处死孕鼠,浓度为75%酒精浸泡5min,固定于超净工作台上。用11号手术刀沿下腹部切开皮肤及腹膜,使盆腔及子宫暴露,可以看见胎鼠在子宫内呈串珠状排列,取出子宫,用眼科剪剪开子宫壁,打开羊膜腔,轻轻挤压,可见胎鼠流出,剪断脐带,移入玻璃皿中。用眼科剪插入胎鼠口角,沿口角处剪断上下颌突,解离完整的胎鼠下颌突,置于4%多聚甲醛固定液中。新生乳鼠用过量水合氯醛腹腔注射处死,在浓度为75%的酒精中浸泡30s。用同样的方法解离下颌突,置于4%多聚甲醛固定液中。梯度乙醇脱水,石蜡包埋固定,HE染色,组织切片,光学显微镜下观察。结果:在胚胎期13天时,牙胚的发育进入蕾状期,局部上皮细胞增厚并向内凹陷;在胚胎期第14天,向内凹陷明显,形成如花蕾状包绕在一起的上皮芽;在胚胎期第16天,牙胚发育进入帽状期,外釉上皮层、星网状层、内釉上皮层分界清晰;在胚胎期第18天,牙胚发育进入钟状期,可见到明显的钟状期成釉器四层细胞结构;在胚胎期第20天,牙胚发育进入钟状晚期,此时内釉上皮层的基底膜被牙本质基质所取代内釉上皮细胞分化为逐渐分化为成釉细胞;出生后2天的新生鼠,成釉细胞进入分泌早期,出生后3天的新生鼠,釉基质增加,前期牙本质形成牙本质基质。结论:1.本实验较为系统的观察了大鼠成釉器发育的组织形态学变化,明确大鼠成釉器发育的组织学时序特点,初步确定了大鼠成釉器发育的各个阶段所对应的胚胎时期。2.大鼠成釉器的组织形态与人成釉器组织形态基本相似,此实验获得了大鼠成釉器的组织形态动态发展模型,可为牙齿发育异常的发病机制提供前期基础。3.大鼠牙胚经历了蕾状期、帽状期、钟状期一系列动态发展过程,在此发展过程中,成釉器、牙乳头、牙囊的相互作用,最终形成正常的牙齿形态结构。
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