丹参水溶性成分的分离及其抗炎作用

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丹参是唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge的干燥根和根茎,具有活血祛瘀,通经止痛,凉血消痈的功效。本课题组前期研究表明,由丹参、黄连、连翘、红花等组成的复方制剂具有显著抗菌抗炎作用,进一步研究表明丹参的脂溶性成分具有抑菌作用。在此基础上,本试验对丹参的水溶性成分进行了分离及抗炎作用研究,取得以下结果:(1)丹参水溶性成分的分离纯化及结构鉴定:丹参水溶性部位萃取物,通过D101大孔树脂梯度洗脱,硅胶柱色谱等方法,分离纯化得到4种单体化合物,经理化性质、核磁共振谱检测分析,分别鉴定为:丹酚酸B、迷迭香酸、咖啡酸、原儿茶醛。(2)丹参水溶性部位萃取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响:丹参水溶性部位萃取物,在高剂量(10 g/kg)、中剂量(5 g/kg)时能极显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀,与空白对照组差异极显著(P<0.01),且不同剂量组之间差异极显著(P<0.01),说明丹参水溶性部位萃取物具有显著抗炎作用。(3)丹参水溶性萃取物及单体化合物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响:丹参水溶性部位萃取物、咖啡酸、原儿茶醛、丹酚酸B和迷迭香酸分别在浓度为2.5、2.5、2.5、0.5、0.5μg/mL及以上,对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力显著或及显著提高(P<0.05或P<0.01),说明丹参水溶性部位萃取物、丹酚酸B、迷迭香酸、咖啡酸和原儿茶醛均能促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力。(4)丹参水溶性部位萃取物及单体化合物对小鼠腹腔巨噬细胞分泌炎性因子的影响:丹参水溶性部位萃取物在62.5μg/mL能显著抑制LPS激的小鼠腹腔巨噬细胞IL-6分泌(P<0.05);丹酚酸B、迷迭香酸、原儿茶醛分别在浓度为15.625、15.625、3.906μg/mL及以上时,对TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌有显著抑制作用(P<0.05或P<0.01);咖啡酸在浓度为15.625μg/mL及以上时,对TNF-α和IL-6的分泌有显著抑制作用(P<0.05或P<0.01)。原儿茶醛与其他单体化合物相比在低浓度(3.906μg/mL)时其抑制TNF-α分泌的作用较强(P<0.05),原儿茶醛和丹酚酸B与其他单体化合物比,在低浓度时(3.906μg/mL)时其抑制IL-6、IL-1β分泌的作用较强(P<0.05)。说明丹参水溶性部位萃取物及单体化合物均能不同程度抑制炎性因子分泌,其中原儿茶醛和丹酚酸B有较强抑制作用。
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