乳腺癌现阶段已经成为威胁女性健康的常见癌症之一,考虑到患者总体的情况,目前病理学上对其的诊断还是以免疫组织化学（IHC）为主,在进行IHC之前,对于组织有一定的处理办法,一般是常规切片和冰冻切片,常规切片又称作石蜡切片,在组织固定之后用石蜡对其进行包埋,再根据需求进行切片,进行对应的指标检测或者在脱蜡刮片后进行基因检测,优点是保存时间长,可以完整的确定组织中每一个细胞的情况。冰冻切片常与术中快检相结合,一般是临床医生在手术中为了确定肿瘤的具体（恶性肿瘤范围、病理诊断或者淋巴结状态等）,优点是速度快,但是在对组织进行冰冻的过程中,冰晶的产生会对细胞结构造成破坏。本实验通过研究同一块组织的常规切片、冰冻切片、“冻剩”组织后的常规切片进行对比,观察不同处理方法对乳腺癌检测指标是否具有影响,同时对比两者在DNA片段化上的情况,研究DNA的降解情况。1.患者资料收集及标本处理。收集2020年8月-2020年10月湖北省肿瘤医院病理科同时接受常规切片和冰冻切片的乳腺癌患者的临床病理学资料,按照2003年WHO乳腺肿瘤组织学标准进行病理分型,临床分期按照2018年第8版美国癌症联合委员会临床分析标准,病历学数据来自病理科和分子病理科病历系统。按照病理学编号找到对应的蜡块,整理分类,重新切片,根据不同的流程处理分成实验组和对照组,重新判读并记录。2.HE、IHC染色及FISH检测。HE染色查看组织的细胞核和细胞膜情况,发现实验组的整体染色情况较差,细胞体积皱缩明显,核仁、核膜不清晰,对切片的判读有影响。IHC染色检测组织上ER、PR、HER-2、KI-67、E-ca、P120的表达情况,发现ER、PR和Ki67核着色的指标实验组和对照组阳性定位均准确,但实验组染色强度比对照组深（p<0.05）,部分组织同时存在胞浆着色的情况;E-cadherin和p120膜着色定位准确,染色强度与对照组比较均有统计学意义（p<0.001）,其中实验组E-cadherin较对照组染色强度强,但p120却较对照组弱;HER-2着色定位准确,实验组虽然较对照组染色深,但差异无统计学意义（p>0.05）。针对乳腺癌主要检测指标上的表现情况,确定FISH检测对象,FISH以HER-2/CEP17为主,查看HER-2基因的扩增情况,发现实验组和对照组在消化时间上是具有差异性,但是整个制片质量上不具有差异性。3.DNA提取、纯化及片段化检测。对冰冻切片,实验组,对照组的切片进行刮片脱蜡纯化处理,检测三种类型的切片在100bp-300bp下的片段化程度,鉴定不同处理方法对DNA降解情况的影响。发现实验组和对照组在100bp、200bp及300bp片段的核酸CT值无统计学差异,但和冻片组比较,后者300bp片段CT值较小,表明冻片组的DNA质量是优于实验组和对照组的,降解程度较低。通过上述研究发现,“冻剩组织”的常规切片和常规切片在免疫组化检测部分的情况上大体符合,但是在染色深浅程度上还是有一定的差异的存在,冻剩组织多数存在膜阳现象,推测与组织保存的新鲜程度相关;从DNA降解程度来看则差异性比较大,从总体上来说不影响细胞学的病理诊断,对于肿瘤分类没有影响,表明经过术中快速冷冻流程的蜡块可以用于进行分子病理学检测,但是不适用于进行IHC及HE染色判断组织组织类型及指标表达量。