论文部分内容阅读
【背景和目的】骨髓间质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)因具有很强的分裂、增殖及自我更新能力,传统上认为MSCs可分化为肌细胞、骨细胞、血细胞等组织细胞。近年来研究发现MSCs在一定的条件下可横向分化为神经细胞,如在有丝分裂因子、维甲酸类化合物、神经营养因子、中药等诱导下。唐氏综合症细胞粘附分子(Down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)的基因位于21q22,其过量表达,如21号染色体的三体化,即唐氏综合症(Downsyndrome),造成神经细胞迁移、增殖、分化的异常,最终导致先天性智能发育障碍。若DSCAM表达降低则出现神经连接异常机会增加。而且,DSCAM是神经细胞连接中必须的细胞粘附分子,在轴突和树突的生长、突触的形成、对神经网络的形成和维持有重要作用。研究唐氏综合症细胞粘附分子(DSCAM)在大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经细胞中的作用。【方法】在建立黄芩苷诱导大鼠MSCs分化为神经细胞的基础上,采用免疫细胞化学法、Western Blot法等检测DSCAM的表达变化;同时采用RNA干扰技术,观察DSCAM-siRNA转染MSCs后诱导分化情况。【结果】诱导前大鼠MSCs不表达DSCAM:预诱导24h:MSCs开始少量表达DSCAM(1.71%±0.67%);黄芩苷诱导6h,部分表达DSCAM(15.79%±4.24%);诱导后3d,DSCAM表达最高(53.16%±5.94%);诱导6d,DSCAM表达明显下降(28.99%±6.72%)。DSCAM-siRNA转染MSCs,DSCAM表达显著下降。而且,诱导前MSCs不表达神经细胞特异性标记蛋白β-Ⅲ-tubulin;诱导6h,β-Ⅲ-tubulin表达为(1.40%±0.79%)。诱导3d达到(41.59%±3.17%);诱导6d,β-Ⅲ-tubulin表达为(59.11%±4.76%)。但是,DSCAM-siRNA转染MSCs,诱导3d、6d,β-Ⅲ-tubulin蛋白的表达显著下降(28.57%±2.91%、43.90%±12.31%)。【结论】DSCAM可能在骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经细胞中可能起到重要的作用。