【摘 要】
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目的研究戊四氮（pentylenetetrazole,PTZ）诱导的慢性癫痫幼鼠血清和海马组织中泛素羧基末端水解酶L1（ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1,UCHL1）、高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein,HMGB1）的表达情况,及使用甘草酸（glycyrrhizic acid,GA）、鼠神经生长因子（
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目的研究戊四氮（pentylenetetrazole,PTZ）诱导的慢性癫痫幼鼠血清和海马组织中泛素羧基末端水解酶L1（ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1,UCHL1）、高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein,HMGB1）的表达情况,及使用甘草酸（glycyrrhizic acid,GA）、鼠神经生长因子（mouse nerve growth factor,m NGF）干预后对其表达的影响,探讨癫痫后脑组织损伤情况以及GA、m NGF脑保护作用。方法130只清洁级wistar雄性大鼠幼崽,日龄21天,随机分为4组:A组（正常对照组,n=31只）、B组（未干预组,n=33只）、C组（m NGF组,n=33只）、D组（GA组,n=33只）。给药方式:腹腔注射。造模期间:A组每日给予等量9g/L生理盐水,其它组按40mg/kg予PTZ,给药14d建立慢性癫痫模型后进行干预;干预期间:A、B组每日给予等量9g/L生理盐水,C组按4ug/kg予m NGF,D组按30mg/kg予GA,连续7天。每次给药后观察每只幼鼠30-60min,并记录相应行为学改变,末次给药后每组于3h、24h、72h随机各处死9-10只幼鼠,取腹腔干血及左侧海马用ELISA法检测血清中HMGB1、UCHL1及海马组织中UCHL1浓度,取右侧海马组织用Western Blot法检测其内HMGB1蛋白表达情况。结果1.幼鼠行为学表现:在每次给药前幼鼠均自由进食、自主活动。A组无明显不适,无死亡;B、C、D组经腹腔注射戊四氮后均出现不同程度的癫痫发作,且随着建模时间延长其发作等级逐步增高,有的甚至死亡,点燃14天后建立慢性癫痫模型。2.ELISA法检测结果:血清HMGB1的检测结果发现:在各时间点,B组血清HMGB1浓度最高,A组最低,B、C、D组高于A组,差异有统计学意义（均P=0.000）;C、D组各时间点均低于B组,存在显著差异（其中C、B组比较P分别=0.000、0.000、0.007,D、B组比较P均=0.000）;C组各时间点均高于D组,存在显著差异（P分别=0.002、0.000、0.002）。血清UCHL1的检测结果提示:在各时间点,A组血清UCHL1浓度最低,B组最高;C、D组各时间点均低于B组,差异有统计学意义（其中C、B组比较P分别=0.003、0.001、0.013,D、B组比较P分别=0.000、0.001、0.000）。海马UCHL1的检测结果发现:各组幼鼠各时间点海马UCHL1的变化趋势与血清UCHL1的变化趋势相似,A组海马UCHL1浓度最低,B组海马UCHL1浓度最高,B、C、D组高于A组,差异有统计学意义（均P﹤0.05）;C、D组明显低于B组,存在显著差异（其中B、C组比较P分别=0.000、0.000、0.001,B、D组比较P均=0.000）。3.Western Blot法检测结果:在各时间点,B组海马组织中HMGB1表达水平最高,A组最低,B、C、D组均高于A组,差异有统计学意义（均P=0.000）;C、D组在各时间点均低于B组,存在显著差异（其中C、B组比较P分别=0.000、0.032、0.003,D、B组比较P均=0.000）;D组在各时间点均低于C组,二者比较差异有统计学意义（P分别=0.020、0.000、0.003）。结论1.HMGB1、UCHL1在癫痫脑组织及血清中存在高表达;血清UCHL1可以作为癫痫相关脑损伤的生物标志物。2.GA可抑制HMGB1的释放和表达,减轻炎症反应,从而起到脑保护作用。3.mNGF对癫痫产生的神经损害具有修复作用,对脑损伤有保护作用。4.GA在抑制HMGB1释放和表达上更优于mNGF。
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