MicroRNA-10a-5p及PIK3CA在中耳胆脂瘤中的表达及相关性研究

来源 :暨南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cherish_zww
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目的:研究微小RNA-10a-5p(microRNA-10a-5p,miR-10a-5p)及靶基因磷脂酰肌醇-4,5-双磷酸3-激酶催化亚基α(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha,PIK3CA)在中耳胆脂瘤中的表达,并分析其相关性,探讨它们在中耳胆脂瘤的发病机制中发挥的作用,为中耳胆脂瘤的非手术治疗提供新的研究思路和方法。方法:1.收集共计27例中耳胆脂瘤和耳后正常皮肤组织标本。其中实验组为中耳胆脂瘤组织,对照组为耳后正常皮肤组织。2.通过Target Scan、miRBase等生物信息学软件预测PIK3CA是miR-10a-5p的下游靶基因。3.实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)分别检测miR-10a-5p及PIK3CA的mRNA在中耳胆脂瘤及耳后正常皮肤组织中的表达情况。4.分别用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹(Western Blot)检测PIK3CA在中耳胆脂瘤及耳后正常皮肤组织中的表达。5.分析miR-10a-5p及PIK3CA mRNA在中耳胆脂瘤中表达的相关性,探讨miR-10a-5p是否通过调控PIK3CA的功能进而参与中耳胆脂瘤组织的生长和增殖等生物学过程。结果:1.qRT-PCR结果提示:miR-10a-5p在中耳胆脂瘤和耳后正常皮肤组织中均有表达,在中耳胆脂瘤中的表达量(0.99±0.03)显著低于耳后正常皮肤组织(1.61±0.32),差异具有统计学意义(P<0.05)。2.qRT-PCR结果提示:PIK3CA mRNA在中耳胆脂瘤和耳后正常皮肤组织中均有表达,在中耳胆脂瘤中的表达量(2.06±0.23)显著高于耳后正常皮肤组织(1.02±0.05),差异具有统计学意义(P<0.05)。3.免疫组织化学结果提示:PIK3CA在中耳胆脂瘤中从基底层到基底上层均有表达,主要位于细胞质及细胞膜,染色程度多呈中至强阳性;在耳后正常皮肤组织的基底层和少部分基底上层细胞染色,主要位于细胞核及细胞膜,染色程度多为弱阳性。4.Western Blot结果提示:PIK3CA在中耳胆脂瘤中的表达量显著高于耳后正常皮肤组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.Pearson相关分析结果显示:中耳胆脂瘤组织中miR-10a-5p与PIK3CA呈显著负相关关系(r=﹣0.926,P<0.001)。结论:1.在中耳胆脂瘤组织中低表达的miR-10a-5p可能对胆脂瘤的生长和增殖起抑制作用。2.在中耳胆脂瘤组织中高表达的PIK3CA可能对胆脂瘤的生长和增殖起促进作用。3.中耳胆脂瘤组织中miR-10a-5p与PIK3CA的表达呈负相关,提示下调的miR-10a-5p可能通过负性调控其靶基因PIK3CA的功能,来影响胆脂瘤角质形成细胞的增殖和分化过程。
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