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循证研究:目的:已有多个研究发现DKD患者的血清micro RNA-21水平与单纯DM患者、健康人群相比存在显著差异,但尚未有循证医学上的证据,因此,本研究拟采用Meta分析的方法以探讨micro RNA-21与DKD的相关性,从而为micro RNA-21未来的临床应用提供一定的循证依据。方法:计算机检索Cochrane Library、Pub Med、EMbase、Ovid、CNKI、Wanfang Data、VIP和CBM数据库,搜集micro RNA与糖尿病肾脏病相关的横断面研究,检索时限均从建库至2020年5月。由2名研究者独立筛选文献、提取资料后,采用Stata 14.0软件对纳入指标进行Meta分析。结果:共纳入9个横断面研究,包括研究对象1051例,其中DKD组513例,单纯DM组259例,健康人群组279例。Meta分析结果显示,采用△△CT法处理RT-q PCR检测结果时,糖尿病肾脏病组micro RNA-21表达高于单纯糖尿病组（P<0.05）,糖尿病肾脏病组micro RNA-21表达高于健康人群组（P<0.05）。结论:Micro RNA-21在DKD患者中表达高于DM患者及正常人群,可作为DKD的早期诊断生物标志物。实验研究:目的:基于micro RNA-21及其下游的PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路,利用db/db小鼠作为动物模型,观察降糖三黄片对db/db小鼠糖脂代谢水平、肾功能、24h尿蛋白水平、肾脏组织病理改变及micro RNA-21信号通路的印象,为探讨降糖三黄片防治DKD的可能作用机制,为其临床应用提供一定的实验依据。方法:32只7周龄雄性db/db小鼠及8只7周龄雄性db/m小鼠经普通饲料适应性喂养1周后,按随机数字表法将32只老鼠随机分成模型组、降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组及厄贝沙坦组4组。实验药物干预8周,试验期间观察小鼠的一般情况,每2周测小鼠体重、饮水量、摄食量及尾尖空腹血糖,在用药前及用药8周后,检测24小时尿蛋白定量,实验结束后检测小鼠肾功能（CREA、BUN）,脂代谢（CHOL、TG、HDL-C、LDL-C）,光镜观察小鼠肾脏病理形态,Western blotting法检测正常组、模型组、降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组LC3B、p62、PTEN、PI3K、Akt、mTOR蛋白表达,RT-q PCR法检测各组上述四组小鼠LC3B、p62、micro RNA-21 m RNA的表达。结果:1.体重、饮水量、摄食量方面:体重方面,治疗8周后,降糖三黄片高剂量组体重较治疗前稍有下降,其他各组体重都有一定程度的升高,与模型组相比,降糖三黄片高剂量组体重下降明显（P<0.05）,降糖三黄片低剂量组及厄贝沙坦组体重略有下降,两组间差异不具有统计学意义（P>0.05）。饮水量及摄食量方面,治疗8周后,与模型组相比,降糖三黄片高剂量组与降糖三黄片低剂量组下降明显（P<0.05）,且高剂量组下降较低剂量组更明显,差异具有统计学意义（P<0.05）,厄贝沙坦组与模型组相比无明显差异（P>0.05）。2.糖脂代谢方面:治疗8周后,与模型组相比,降糖三黄片高剂量组及降糖三黄片低剂量组血糖下降（P<0.05）,且高剂量组下降较低剂量组更明显,差异具有统计学意义（P<0.05）,厄贝沙坦组与模型组血糖无明显差异（P>0.05）。脂代谢方面,治疗8周后,与模型组相比,降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组及厄贝沙坦组CHOL、TG、LDL-C均有所下降（P<0.05）,其中,降糖三黄片高剂量组CHOL及TG下降程度更大,与降糖三黄片低剂量组和厄贝沙坦组差异具有统计学意义（P<0.05）。3.尿蛋白及肾功能方面:治疗8周后,正常组、模型组、降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组24h尿蛋白均有上升,厄贝沙坦组24h尿蛋白有所下降,且与正常组差异无统计学意义（P>0.05）;与模型组相比,降糖三黄片高剂量组及降糖三黄片低剂量组上升较少（P<0.05）,其中降糖三黄片高剂量组上升少于降糖三黄片低剂量组（P<0.05）。肾功能方面,治疗8周后,与模型组相比,降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组、厄贝沙坦组肌酐及尿素氮水平均有下降（P<0.05）,其中厄贝沙坦组和降糖三黄片高剂量组下降较降糖低组更为明显,两组间差异无统计学意义（P>0.05）,和降糖三黄片低剂量组间差异具有统计学意义（P<0.05）。4.光镜下观察肾脏病理形态:正常组小鼠未见病理改变,模型组小鼠肾脏病变严重,可见肾小球体积明显增大,肾小囊扩张,肾小球毛细血管丛不清晰,系膜及基底膜增厚,伴肾小球上皮细胞空泡化,且胞浆内可见小空泡。降糖三黄片高剂量组、低剂量组及厄贝沙坦组与模型组相比,病变范围较小,病变程度较轻。5.肾脏LC3B、p62、PTEN、PI3K、Akt、mTOR蛋白表达:治疗8周后,降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组与模型组相比,LC3B表达增加（P<0.05）,p62表达减少（P<0.05）,其中降糖三黄片高剂量组与正常组相比,p62表达不具有统计学差异（P>0.05）。与模型组相比,降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组PTEN蛋白表达上调（P<0.05）,其中降糖三黄片高剂量组组上调更为明显,与降糖三黄片低剂量组相比差异具有统计学意义（P<0.05）;PI3K/Akt/mTOR通路蛋白表达均有所下降（P<0.05）,其中降糖三黄片高剂量组下降更为明显,与降糖三黄片低剂量组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。6.肾脏LC3B、p62、micro RNA-21 m RNA表达:治疗8周后,与模型组相比,降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组LC3B m RNA表达上调（P<0.05）,p62 m RNA表达下调（P<0.05）,其中降糖三黄片高剂量组LC3B上调更为明显,其表达量与正常组相比无统计学差异（P>0.05）,与降糖三黄片低剂量组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比,降糖三黄片高剂量组、降糖三黄片低剂量组micro RNA-21表达下调（P<0.05）,其中降糖三黄片高剂量组下调更为明显,与降糖三黄片低剂量组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.循证研究方面,micro RNA-21在DKD中表达高于DM及正常人群,可作为DKD的诊断生物标志物。2.实验研究方面,降糖三黄片可改善db/db小鼠的一般状态,可降低血糖、调节血脂,改善糖脂代谢,且高剂量组效果优于低剂量组。3.降糖三黄片可降低db/db小鼠血清肌酐、尿素氮及24h尿蛋白,能一定程度改善db/db小鼠的肾脏组织病理,具有保护db/db小鼠肾功能的作用。4.降糖三黄片能上调db/db小鼠LC3B蛋白及m RNA的表达,下调p62蛋白及m RNA的表达,具有提高db/db小鼠肾脏自噬水平的作用,且高剂量组效果优于低剂量组。5.降糖三黄片能上调db/db小鼠PTEN蛋白的表达,下调PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达,能下调micro RNA-21 m RNA的表达,且高剂量组效果优于低剂量组。6.降糖三黄片可能通过下调micro RNA-21的表达,激活PTEN,从而抑制PI3K/Akt/mTOR通路,启动自噬,进而保护肾脏。