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目的:研究干扰lncRNA NBR2的表达对胃癌BGC823细胞的增殖、迁移、侵袭、周期和凋亡的影响,并初步探讨lncRNA NBR2对BRCA1表达的调控作用,为临床设计有效治疗胃癌的策略提供实验依据。方法:1.qRT-PCR、Western blot分别检测lncRNA NBR2和BRCA1在胃癌细胞系MGC803、SGC7901和BGC823以及胃粘膜上皮细胞系GES1中的表达水平。2.构建pPLK GFP+Puro/NBR2shRNA干扰载体(shRNAa、shRNAb和shRNAc),将其分别瞬时转染至胃癌BGC823细胞中,qRT-PCR筛选出具有最高干扰效率的载体用于后续实验。3.MTT实验、划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验以及流式细胞仪探究干扰lncRNA NBR2的表达对胃癌BGC823细胞的增殖、迁移、侵袭、周期和凋亡的影响。4.qRT-PCR、Western blot检测lncRNA NBR2敲低后对BRCA1在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果:1.qRT-PCR结果显示,与GES1细胞相比,lncRNA NBR2在三种胃癌细胞系中表达水平均明显上调(P<0.05),并且在BGC823胃癌细胞中的表达最高。而BRCA1在BGC823和SGC7901细胞中的表达明显增加(P<0.05),但在MGC803细胞中的表达无明显变化(P>0.05)。2.Western blot结果发现,BRCA1在BGC823、SGC7901细胞中表达水平明显高于GES1细胞(P<0.05),而在MGC803细胞中的表达与GES1细胞比较稍下调(P>0.05)。3.荧光显微镜观察结果:三个干扰载体组和空载体对照组的转染效率均在80%以上。qRT-PCR结果发现,相较于未转染组和空载体对照组,NBR2在NBR2 shRNAc组中的表达没有明显改变(P>0.05),而在NBR2 shRNAa组和NBR2 shRNAb组中表达明显下调(P<0.05),其中NBR2 shRNAa载体的干扰效果最为明显,其干扰效率约为65%,因此我们选择NBR2 shRNAa载体用于后续实验。4.MTT实验结果显示,NBR2 shRNA转染组在48h、72h和96h时的OD值(490nm)均显著低于未转染组和空载体对照组(P<0.05),且抑制率呈时间依赖性增高。说明干扰lncRNA NBR2的表达能抑制胃癌BGC823细胞增殖。5.划痕实验结果显示,在0~24 h和24~48h内,NBR2 shRNA转染组的细胞相对迁移距离(85.867±5.254和56.600±4.612)均显著小于未转染组(222.570±5.257和140.710±3.278)和空载体对照组(218.033±5.341和135.667±7.353)(P<0.05)。Transwell迁移实验同样发现,NBR2 shRNA转染组迁移细胞的数量(50.500±2.887)明显少于未转染组(194.750±6.801)和空载体对照组(191.250±5.909)(P<0.05)。以上结果说明lncRNA NBR2敲低后能抑制胃癌BGC823细胞的迁移能力。6.Transwell侵袭实验结果显示,NBR2 shRNA转染组侵袭细胞的数量(39.500±2.380)明显少于未转染组(115.750±4.573)和空载体对照组(112.250±5.315)(P<0.05)。以上结果说明lncRNA NBR2敲低后能抑制胃癌BGC823细胞的侵袭能力。7.流式细胞仪检测结果显示,NBR2 shRNA转染组BGC823细胞周期与未转染组和空载体对照组相比,G0/G1期细胞比例显著增高,而S期和G2/M期细胞比例及细胞增殖指数均明显降低(P<0.05),表明干扰lncRNA NBR2可抑制人胃癌BGC823细胞增殖并阻滞细胞于G0/G1期。NBR2 shRNA转染细胞的凋亡比率(26.240±0.325)明显高于未转染组(3.440±0.016)和空载体对照组(6.150±0.248)(P<0.05),说明干扰lncRNA NBR2的表达可以促进胃癌BGC823细胞的凋亡。8.qRT-PCR和Western blot结果显示,相较于未转染组和空载体对照组,NBR2 shRNA组中BRCA1在mRNA和蛋白水平的表达均明显下调(P<0.05)。说明敲低lncRNA NBR2可以抑制BRCA1的表达。结论:1.lncRNA NBR2敲低后能抑制胃癌BGC823细胞的增殖、迁移侵袭,阻滞细胞于G0/G1期并诱导凋亡。2.lncRNA NBR2敲低后能下调BRCA1的表达。