基于低共熔溶剂萃取结合酶抑制法检测食品中的氨基甲酸酯类农药

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gift19852003
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氨基甲酸酯类农药由于其生物活性广、生物积累潜力低、对昆虫的杀灭效果好等特点,在世界范围内被用于防治农业害虫和杂草。但过度施用会在作物中形成有害残留物,对人体健康造成威胁。因此,建立快速、便捷的食物中农药残留的提取检测技术,对于强化食品安全工作总体水平以及保障人民生命安全具有重要的意义与价值。本文将使用绿色低毒的样品前处理技术与快速便捷的检测技术结合,建立对食品中氨基甲酸酯类农药的提取和检测方法,具体包括:(1)基于低共熔溶剂萃取结合酶抑制荧光法检测灭多威。本实验合成并应用环保的低共熔溶剂(L-脯氨酸和乙二醇)为萃取剂,作为传统的有毒萃取溶剂的绿色替代品,可以高效萃取粮食中的灭多威。使用小米合成带负电的生物质碳量子点作为荧光探针,乙酰胆碱酯酶可催化碘化乙酰硫代胆碱生成大量带正电的硫代胆碱,其与带负电的量子点发生静电吸附,使量子点的荧光发射猝灭。灭多威会抑制乙酰胆碱酯酶的活性,使其失去水解碘化乙酰硫代胆碱的能力,硫代胆碱的生成减少,量子点的荧光得以恢复。随农药浓度的增加,量子点的荧光逐渐增强。基于此建立了一种粮食中灭多威残留的检测方法。结果表明:在最佳提取检测条件下,灭多威在0.01~5 mg/kg的范围内线性良好。定量限为0.01 mg/kg,检出限为0.003 mg/kg。并且该检测体系可以被良好的应用在小米,小麦,大米,大麦等粮食中灭多威的检测,回收率为86.5%~107.8%,此方法具有绿色环保,高效,便捷的优点,在实际样品的有毒有害物质的提取检测中具有良好的应用前景。(2)基于胶带粘贴DES萃取结合酶抑制紫外分光光度法检测二硫代氨基甲酸酯类农药。本文利用胶带的透明和黏附性,通过简单的粘贴剥离,实现食物样品表面二硫代氨基甲酸酯类农药(DTCs)残留的高效提取,然后将其放入由木糖醇和乙二醇合成绿色环保的低共熔溶剂中洗脱,完成对DTCs的快速高效提取。酪氨酸酶作为催化剂可以使邻苯二酚氧化诱导其与4-氨基安替吡啉耦合生成有色物质,溶液由无色变为粉色,在510nm处有明显吸收光谱。DTCs可抑制酶活性,使其氧化能力减弱,与4-氨基安替吡啉反应生成的有色物质减少,溶液颜色变为浅粉色,在510nm处的吸光度值变小。酪氨酸酶也可以氧化连苯三酚和邻氨基苯酚,诱导其与4-氨基安替吡啉发生显色反应。通过实现酪氨酸酶-酚类物质和4-氨基安替吡啉的阵列,在特定吸收波长下测定吸光值,使用主成分分析实现不同DTCs的测定和鉴别。结果表明:在最佳提取检测条件下对福美锌的检测在0.6 ng~6000 ng的范围内线性良好,定量限为0.6 ng,检出限为0.2 ng。通过酪氨酸酶和邻苯二酚、连苯三酚和邻氨基苯酚,4-氨基安替吡啉的阵列在60 ng用主成分分析区分了7种二硫代氨基甲酸酯类农药,并且该体系也成功运用于玉米、番茄、苹果等实际样品中DTCs的测定和鉴别。本实验操作简单、方便,在现场检测中有良好的应用前景。
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